ልዩ (ተመራጭ) የአመጋገብ ሚዲያ

የእርሾ እድገት ሚዲያ

ሰራሽ አንባቢ መካከለኛ

የመካከለኛው ንጥረ ነገር ስብስብ, g / l: ammonium sulfate 3, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.7, ካልሲየም ናይትሬት 0.04, ሶዲየም ክሎራይድ 0.5, ፖታሲየም ዳይሮጅን ፎስፌት 1.0, ፖታሲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 0.1 ያካትታል. የመጀመሪያ ፒኤች 6.6. በእርሾ ጥቅም ላይ የማይውል ካልሲየም ናይትሬት ከመካከለኛው ሊወገድ ይችላል. የእርሾን ማባዛትን ለማጥናት 2% ስኳር ይጨምሩ, ማፍላትን ለማጥናት - 5-10%. ሙሉው ሰው ሰራሽ ንጥረ ነገር ክሪስታል ቪታሚኖችን, mcg / ml: inositol 5, biotin 0.0001, pantothenic acid 0.25, thiamine 1.0, pyridoxine 0.25, ኒኮቲኒክ አሲድ 0.5 ይዟል. መካከለኛውን በ 0.1 M ፓ ግፊት ለ 20 ደቂቃዎች በአውቶክላቭ ውስጥ ማምከን.

ግሉኮስ-አሞኒየም መካከለኛ

በ 1 ሊትር የቧንቧ ውሃ ውስጥ የሚከተሉትን ንጥረ ነገሮች ይይዛል, g: ammonium sulfate 5, potassium dihydrogen ፎስፌት 0.85, ፖታሲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 0.15, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.5, ሶዲየም ክሎራይድ 0.1, ካልሲየም ክሎራይድ 0.1, ግሉኮስ 20, agar 20 ከእድገት ምክንያቶች ጋር ለማበልጸግ, እርሾ (0.2%) ወይም ስጋ (0.3%) የማውጣት እና የወይን ጭማቂ ይጨመራሉ.

ያልተጠናቀቁ እርሾዎችን ለመለየት ሰው ሰራሽ መካከለኛ

በ 1 ሊትር የቧንቧ ውሃ ውስጥ የሚከተሉትን ንጥረ ነገሮች ይይዛል, g / l: ግሉኮስ 50, ሊሲን 3, ፖታሲየም ዳይሮጅን ፎስፌት 1, ማግኒዥየም ሰልፌት 1, የብረት ሰልፌት - መከታተያዎች. እያንዳንዱ አካል በተናጥል በውሃ ውስጥ ይሟሟል እና በተጠቀሰው ቅደም ተከተል ይጨመራል። አጋር (1.5%) ወደ መካከለኛው ውስጥ ይጨመራል, ይቀልጣል, በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ይፈስሳል እና በ 0.05 MPa ግፊት ለ 20 ደቂቃዎች ይጸዳል.

ያልተጠናቀቁ እርሾዎችን ለመለየት ከሊሲን ጋር የተሟላ መካከለኛ

በ 1 ሊትር የቧንቧ ውሃ ውስጥ የሚከተሉትን ንጥረ ነገሮች ይይዛል, g / l: ግሉኮስ 50, ማግኒዥየም ሰልፌት 1, ፖታሲየም ዳይሮጅን ፎስፌት 2, ፖታስየም ላክቴት 12 ml (50% መፍትሄ), /, (+) lysine monohydrate 1, የቫይታሚን መፍትሄ (በአንድ). 100 ሚሊ ሜትር የጸዳ የተጣራ ውሃ ይጨምሩ, ሰ: ኢንሶሲቶል 2, ካልሲየም ፓንታቶቴት 0.4, ኒኮቲናሚድ 0.5, hydrattiamine 0.1, agar 20; የመካከለኛው ፒኤች - 5-5.2. መካከለኛው በ 15 ሚሊ ሜትር የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ይፈስሳል እና ለ 15 ደቂቃዎች ይጸዳል. የ 0.1 MPa ግፊት.

ያልተጠናቀቁ እርሾዎችን ለመለየት አሲቴት መካከለኛ

ለ 1 ሊትር የቧንቧ ውሃ 10 ግራም የሶዲየም አሲቴት, 10 g ammonium ክሎራይድ, 5 g ግሉኮስ, 3 ሚሊር እርሾ autolysate, በ 5 ml የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ አፍስሱ እና በ 0.05 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች ማምከን.

ከዋናው ባህል ጋር በሚመሳሰል መልኩ የውጭ እርሾዎችን ለመለየት መካከለኛ

10 ግራም የፔፕቶን, 2 ግራም ፖታስየም ሃይድሮጂን ፎስፌት በ 500 ሚሊ ሜትር ፈሳሽ ውሃ ውስጥ ይቀልጣሉ እና ይጣራሉ. 15 g agar በማጣሪያ ውስጥ ይቀልጣል ፣ 10 ግ ግሉኮስ ፣ 0.4 ግ eosin እና 0.065 ሚሊ ሜትር ሜቲሊን ሰማያዊ (90% የአልኮሆል መፍትሄ) ይጨመራሉ ፣ ከ 1000 ሚሊ ሜትር ሙቅ የተጣራ ውሃ ጋር ተስተካክለው ወደ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ፈሰሰ እና ለ sterilized 15 ደቂቃዎች በ 0. 1 MPa ግፊት. በማምከን ጊዜ ቀለሙ ይጠፋል እና ሲቀዘቅዝ እንደገና ይታያል. መካከለኛው ከ 2 ወር በማይበልጥ ጊዜ ውስጥ ተከማችቷል.

ለ pseudomycelium ምስረታ መካከለኛ

ግሉኮስ pepton agar.ለ 1 ሊትር የቧንቧ ውሃ ይጨምሩ, g: peptone 10, glucose 20, agar 30-35. በ 0.05 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች ማምከን. አስፈላጊ ከሆነ, እርሾ ወይም ስጋን (0.5%) መጨመር ወይም በፈሳሽ መልክ ማብሰል ይችላሉ.

ድንች አጋር. 100 ግራም የተቀቀለ ፣ የታጠበ ፣ በቀጭኑ የተከተፉ ድንች በቀዝቃዛ ቦታ ውስጥ ለብዙ ሰዓታት በ 300 ሚሊ ሜትር የቧንቧ ውሃ ውስጥ ይቀመጣሉ ። የማውጫው ተጣራ, 230 ሚሊ ሊትር ፈሳሽ ወደ 1 ሊትር በቧንቧ ውሃ, 20 ግራም የግሉኮስ እና 30-35 ግራም የአጋር መጨመር, ማቅለጥ እና በ 0.075 MPa ግፊት ውስጥ ለ 1 ሰዓት ማምከን.

እርሾ ውሃ ከካርቦሃይድሬት ጋር (“የቀለም ተከታታይ”)

የእርሾው የካርቦሃይድሬት (የካርቦሃይድሬትስ) መፍላትን የመፍጠር ችሎታ የሚወሰነው በ 2% የሙከራ ስኳር (ግሉኮስ ፣ ማልቶስ ፣ ሳክሮስ ፣ ላክቶስ ፣ ራፊኖዝ ፣ ወዘተ) ያለው እርሾ ውሃ በመጠቀም ነው። መካከለኛው በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ በተንሳፋፊዎች ፣ በዳንባር ቱቦዎች ውስጥ ይፈስሳል እና በከፊል በሚፈስ የእንፋሎት ማምከን። ከተዘራ በኋላ ውጤቱ ከ 2 ቀናት በኋላ ይመዘገባል, አስፈላጊ ከሆነ ከ 7 ቀናት በኋላ አስፈላጊ ከሆነ በ 30 ዲግሪ ሴንቲግሬድ የሙቀት መጠን.

እርሾ ካርቦሃይድሬትን በኦክሳይድ የመቀያየር ችሎታ በሚከተለው ጥንቅር ፣ r / l ላይ ይማራል-አሞኒየም ሰልፌት 5 ፣ ፖታሲየም ዳይሃይድሮጂን ፎስፌት 1 ፣ ማግኒዥየም ሰልፌት 0.5 ፣ አውቶላይትሬት 1 ፣ የሙከራ ስኳር 10 ፣ agar 20። መካከለኛው ይፈስሳል። በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ, በ 0.05 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች sterilized, agar slant ያዘጋጁ. የባህል እድገት ከ 3-4 ቀናት በኋላ ይገመገማል.

እርሾ agar ከስኳር ጋር

0.5% ሶዲየም ክሎራይድ, 1% ግሉኮስ (ወይም 4 ወይም 10% sucrose) እና 2% agar በእርሾ ውሃ ውስጥ, ፒኤች 6.8 (ከግሉኮስ ጋር) እና 6-6.5 (ከሱክሮስ ጋር) ይቀልጣሉ. መካከለኛው በሙከራ ቱቦዎች ወይም በፍላሳዎች ውስጥ ይፈስሳል እና በ 0.05 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች ይጸዳል.

የአንቲባዮቲክ ሚዲያ

ስቴፕቶማይሲን (100 ዩኒት / ሚሊ), ፔኒሲሊን (20-100 ዩኒት / ml), levomycin (50 mg / l), neomycin (100 ዩኒት / ሚሊ): እርሾ ያለውን ተመራጭ ልማት እና አብሮ ባክቴሪያዎች አፈናና, ሰፊ-ስፔክትረም አንቲባዮቲክ ወደ መገናኛ ውስጥ አስተዋውቋል. 20 ዩኒት / ml) እና ወዘተ ወደ አካባቢው በአንድ ላይ ወይም በተናጠል ሊጨመሩ ይችላሉ.

ሚዲያ ለ ascospore ምስረታ

እሮብ ጎሮድኮቫ.በ 1 ሊትር የቧንቧ ውሃ, g: peptone 10, sodium chloride 5, glucose 1 (ወይም 2.5), agar 20; የአከባቢው ፒኤች 7.3 ነው. በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ አፍስሱ እና በ 0.1 MPa ግፊት ለ 15 ደቂቃዎች ማምከን.

McClary acetate agar.ለ 1 ሊትር ፈሳሽ ውሃ መጨመር, g: ሶዲየም አሲቴት 8.2, ፖታሲየም ክሎራይድ 1.8, ግሉኮስ 1, እርሾ መውጣት 2.5, agar 15. Autoclave ለ 15 ደቂቃዎች በ 0.1 MPa ግፊት.

እሮብ Starkey.በ 1 ሊትር የቧንቧ ውሃ ይቀልጣሉ, g: ፖታስየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 1, ፖታሲየም ዳይሮጅን ፎስፌት 0.25, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.25, ካልሲየም ክሎራይድ 0.05, agar 20. በ 0.05 MPa ግፊት ለ 15 ደቂቃዎች ማምከን.

የአስሞፊሊክ እርሾ እድገት መካከለኛ

ወደ 1 ሊትር የግሉኮስ ሽሮፕ (50-60% ዲኤም) 5 g peptone እና 20 g agar ይጨምሩ. ፔፕቶን በእርሾ ውሃ (50 ሚሊ ሊትር) ሊተካ ይችላል. በ 0.05 MPa ግፊት ማምከን.

Molasses wort

200-300 ግራም ወፍራም ሞላሰስ በ 1: 3, በ 95 ዲግሪ ሴንቲግሬድ የሙቀት መጠን እንዲሞቁ እና ለ 2 ሰአታት እንዲቆዩ ከውሃ ጋር ይደባለቃሉ. 3% ዲያሞኒየም ፎስፌት ወደ መፍትሄው ውስጥ ይጨመራል, ከ 5-8% ዲኤም ውስጥ በውሃ የተበጠበጠ እና በሙከራ ቱቦዎች ወይም በጠርሙስ ውስጥ ይጣላል. የ agar መካከለኛ ለማዘጋጀት, 1.5-2% agar ይጨምሩ. በ 0.05 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች በአውቶክላቭ ውስጥ ወይም በከፊል ለ 1 ሰዓት ከ20-24 ሰአታት 3 ጊዜ ክፍተት ውስጥ ማምከን.

የሚበቅሉ ፈንገሶችን ለማደግ ሚዲያ

Beet agar

በደንብ የታጠበ ስኳር ቢትስ ወደ ቁርጥራጮች ተቆርጧል, በቧንቧ ውሃ ይሞላሉ (በ 1 ሊትር ውሃ 20 g beets) እና ለ 30 ደቂቃዎች ያበስላሉ. ማጣሪያው ወደ መጀመሪያው መጠን በውሃ ይወሰዳል ፣ 2% agar ተጨምሯል እና በ 0.1 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች ይጸዳል።

Beet pulp

ንጹህ ንቦች በግሬተር ላይ ይፈጫሉ ፣ በፔትሪ ምግቦች ውስጥ ይቀመጣሉ እና ሳይገለበጡ ፣ በ 0.1 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች ይጸዳሉ።

እሮብ Capek

የመካከለኛው ጥንቅር, g / l: sucrose ወይም ግሉኮስ 30, ፖታሲየም ዳይሃይድሮጅን ፎስፌት 1.0, ሶዲየም ናይትሬት 2.0, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.5, ፖታሲየም ክሎራይድ 0.05, ferrous ሰልፌት 0.1, agar 20. የአጋር ናሙና ፈሰሰ እና እነዚህ ንጥረ ነገሮች ተጨምረዋል. በ 1 ሊትር ፈሳሽ ውሃ ውስጥ ይቀልጣሉ, በሚፈስሰው የእንፋሎት ሙቀት ይሞቃሉ, እና ፒኤች ከ 4.0-5.5 በ 10% የሲትሪክ አሲድ ወይም የሶዲየም ሃይድሮክሳይድ መፍትሄ ይስተካከላል. በማጣራት በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ አፍስሱ እና በከፊል በሚፈሰው እንፋሎት 3 ጊዜ ለ 30 ደቂቃዎች በ 1 ቀን ልዩነት ያጠቡ።

Czapek-Dox ስኳር ናይትሬት agar

አማራጭ 1.ለ 1 ሊትር የተጣራ ውሃ ውሰድ: ሰክሮስ 20, ፖታሲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 0.5, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.5, ሶዲየም ክሎራይድ 0.5, ፖታሲየም ናይትሬት 1, የብረት ሰልፌት, ካልሲየም ካርቦኔት 2-5, agar 20.

አማራጭ 2. ለ 1 ሊትር የተጣራ ውሃ ውሰድ, g / l: sucrose 30, ammonium nitrate 2.5, potassium dihydrogen phosphate 1, ማግኒዥየም ሰልፌት 1, ferrous sulfate 0.01, agar 20.

ግሉኮስ-ስታርች መካከለኛ

በ Czapek sucrose nitrate agar ተመሳሳይ የጨው ክፍሎች, ነገር ግን ከሱክሮስ ይልቅ 25 ግራም የሚሟሟ ስታርች እና 5 ግራም የግሉኮስ መጠን ይወሰዳሉ.

ስታርች አሚዮኒየም agar

የመካከለኛው ውህደት, g / l: የሚሟሟ ስታርች 10, ካልሲየም ካርቦኔት 3, ፖታሲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 1, ማግኒዥየም ሰልፌት 1, ሶዲየም ክሎራይድ 1, ammonium sulfate 1, agar 20. በ 0.05 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች ማምከን.

ረቡዕ Saburo

ወደ 100 ሚሊ ሜትር የጸዳ እርሾ ውሃ ይጨምሩ, g: pepton 5, glucose 4, agar 1.8-2. በ 0.05 MPa ግፊት ወይም በከፊል ለ 20 ደቂቃዎች ማምከን.

የዚህ መካከለኛ መሠረት የእርሾ ውሃ ነው. እርሾ ውኃ ለማዘጋጀት, 70-100 g ትኩስ ተጫንን እርሾ (7-10 g ደረቅ እርሾ) 20-30 ደቂቃዎች distilled ውሃ 1 ሊትር እና 12 ሰዓታት በብርድ ውስጥ ከፍተኛ ሲሊንደር ውስጥ ይቀራሉ. ፈሳሽ ይከፈታል, ሌላ 1 ይጨመራል l ውሃ, ለ 30 ደቂቃዎች ቀቅለው, ማጣሪያ, ፒኤች በሚፈለገው እሴት ያስተካክሉት. የተዘጋጀው መካከለኛ በ 2-3 ደቂቃ ውስጥ በ 20 ደቂቃዎች ውስጥ በ 1 ቀን ልዩነት ውስጥ ይጸዳል. ለ 100 ሚሊ ሜትር የጸዳ እርሾ ውሃ 1% peptone, 2% agar, 1% peptone, 2% agar , ከሟሟ በኋላ, 4% ግሉኮስ ወይም ማልቶስ, ማጣሪያ, ወደ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ አፍስሱ እና በ 0.05 MPa ግፊት ለ 20 ደቂቃዎች ማምከን.

መካከለኛው መደበኛ 1% የፔፕቶን ውሃ በመጠቀም ሊዘጋጅ ይችላል.

የላቲክ አሲድ ባክቴሪያዎችን ለማደግ ሚዲያ

ሃይድሮላይዝድ ወተት (በቦግዳኖቭ መሠረት)

መደበኛ ወይም የተዳከመ ወተት (pH 7.6-7.8) ለ 5 ደቂቃዎች የተቀቀለ, እቃው በደንብ ይንቀጠቀጣል እና ወደ 45 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ የሙቀት መጠን ይቀዘቅዛል እና 0.5-1 g pancreatin በ 1 ሊትር ይጨመራል, ከ4-7 ደቂቃዎች በኋላ 5 ይጨምሩ. ሚሊ ክሎሮፎርም. በ 40 ዲግሪ ሴንቲግሬድ የሙቀት መጠን ውስጥ ለ 18-20 ሰአታት የሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ያስቀምጡ. የፓንክሬን ዱቄት በትንሽ ሙቅ ውሃ ውስጥ ቀድመው መጨመር አለበት. በመጀመሪያዎቹ ሰዓታት ውስጥ ወተቱ ብዙ ጊዜ በማቆሚያው ይከፈታል. የሃይድሮሊክ ወተት በወረቀት ማጣሪያ ውስጥ ተጣርቶ 2-3 ጊዜ በውሃ ይረጫል ፣ ፒኤች ወደ 7.0-7.2 እና ለ 15 ደቂቃዎች በ 0.1 MPa ግፊት ወይም በ 0.05 MPa ግፊት ለ 20 ደቂቃዎች ይጸዳል ።

በሃይድሮሊክ የተቀመመ ወተት

1.5-2.0% agar በሃይድሮሊክ ወተት ውስጥ ይጨመራል. ድብልቁ ወደ ድስት ይሞቃል እና አጋር ሙሉ በሙሉ እስኪፈርስ ድረስ ይቀመጣል። ሞቃታማው መካከለኛ በጥጥ ማጣሪያ ውስጥ ተጣርቶ በሙከራ ቱቦዎች ወይም ጠርሙሶች ውስጥ ይፈስሳል እና በ 0.1 MPa ግፊት ለ 10-15 ደቂቃዎች ይጸዳል.

ከጠቋሚ ጋር የተጣራ ወተት

በሙቅ የሚሞቅ ትኩስ የተጣራ ወተት ከ litmus tincture ጋር ሲሞቅ ወደ ኃይለኛ ሊilac ቀለም ይቀባል። በሚፈስ እንፋሎት (3 ጊዜ ለ 30 ደቂቃዎች በ 1 ቀን ልዩነት) ወይም በ 0.1 MPa ግፊት ለ 10 ደቂቃዎች በራስ-ሰር ክላቭ ማድረግ።

ብቅል ዎርት ከጠፋ እህል ጋር

ብቅል wort ተዘጋጅቷል, ነገር ግን ያለፈውን እህል (12-15% ዲኤም) ሳይለይ. ወደ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ አፍስሱ ፣ የጸዳ ኖራ (2-4%) ይጨምሩ እና በ 0.05 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች ያጸዳሉ።

እርሾ sucrose agar

ለመለየት ላክቶባካለስእና Leuconostoc 0.5% ሶዲየም ክሎራይድ, 10% sucrose እና 2% agar በመጨመር በእርሾ ውሃ መሰረት የተዘጋጀውን መካከለኛ ይጠቀሙ; የአከባቢው pH 6-6.5 ነው.

የበቀለ መካከለኛ

25 ግራም ብቅል (ገብስ) ቡቃያ ለ 10 ደቂቃዎች በ 500 ሚሊ ሜትር ውሃ ይቀቀላል እና ከ 45-50 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ባለው የሙቀት መጠን ከቀዘቀዙ በኋላ በተልባ እግር ከረጢት ውስጥ ተጣርቶ ከተገረፈ የዶሮ ፕሮቲን ጋር ተጣርቶ እንደገና የተቀቀለ እና በ የተጣራ ፕሮቲን ለማስወገድ የወረቀት ማጣሪያ. 1.5% peptone, 2% ስኳር, 2% agar ወደ መፍትሄው ተጨምረዋል እና ለ 30 ደቂቃዎች በ 0.05 MPa ግፊት ይጸዳሉ.

ጎመን ረቡዕ

200 ግራም የተከተፈ ነጭ ጎመን በ 1 ሊትር ውሃ ውስጥ ይፈስሳል, ለ 10 ደቂቃዎች የተቀቀለ, በሁለት የጋዝ ሽፋኖች ይጨመቃል. የተፈጠረው ፈሳሽ በተጣጠፈ ማጣሪያ ውስጥ ተጣርቶ 2 ጊዜ ይሟላል እና 2% ግሉኮስ እና 1% peptone ወደ ዲኮክሽን ይጨመራሉ. ጠንካራ መካከለኛ ለማግኘት, 2% agar ይጨምሩ.

MRS መካከለኛ (የማን መካከለኛ)

የመካከለኛው ውህድ ግ / ሊ: ማንጋኒዝ ሰልፌት 0.05, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.2, ፖታሲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 2, ammonium nitrate 2, sodium acetate 5, pepton 10, Difko yeast extract 5, የስጋ ማውጫ 10, ግሉኮስ 20, tween- 80 ያካትታል. 1 ml, መካከለኛ pH 6-6.5. መካከለኛው ተጣርቶ ለ 30 ደቂቃዎች በክፍልፋይ እርምጃዎች 3 ጊዜ በ 1 ቀን ክፍተት ወይም በአውቶክላቭ በ 0.05 MPa ግፊት ለ 20 ደቂቃዎች ይጸዳል ። በወሊድ ጊዜ በፈሳሽ, በከፊል ፈሳሽ እና በአጋር መልክ ጥቅም ላይ ይውላል Leuconostocእና ላክቶባካሊየስ.

MRS ሚዲያ (በኤ.ኤ. ላንዚየር የተሻሻለ)

MRS-1 አካባቢ.በ 200 ሚሊ ሜትር ፈሳሽ ውሃ ውስጥ ይቀልጡ, ሰ: ማንጋኒዝ ሰልፌት 0.05, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.2, ሳይስቲን 0.2, ፖታሲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 2, አሞኒየም ሲትሬት 2, ሶዲየም አሲቴት 5, ግሉኮስ 20, peptone 10, Tween-80 1 ml (በተናጥል ይቀልጡ). በትንሽ ሙቅ የተቀዳ ውሃ), እርሾ autolysate (አባሪ 2 ይመልከቱ) 50 ሚሊ ሊትር, ጉበት ማውጣት 100 ሚሊ ሊትር. የፈሳሹ መጠን ወደ 500 ሚሊ ሜትር በተቀላቀለ ውሃ እና 500 ሚሊ ሜትር የቦግዳኖቭ ሃይድሮላይድድ ስኪም ወተት, ቀደም ሲል ያልተጸዳ, ፒኤች 6.2-6.8 ተጨምሯል. መካከለኛው ክፍልፋይ በሚፈስ እንፋሎት ተጣርቶ ይጸዳል።

MRS-2 አካባቢ.ለዝርያዎች ሙዚየም ማከማቻ የተነደፈ ላክቶባካሊየስ. 0.15% agar በመጨመር በ MRS-1 መካከለኛ መሰረት የተዘጋጀ. ውጤቱም ከፊል ፈሳሽ መካከለኛ ነው, ከፈሳሽ ጋር ሲነፃፀር ብዙ የአናይሮቢክ ሁኔታዎችን ይፈጥራል.

MRS-3 አካባቢ.የላቲክ አሲድ ባክቴሪያዎችን በሚለይበት ጊዜ ለ "የተለያዩ ተከታታይ" የተነደፈ. እሱ በ MPC-1 መካከለኛ ላይ የተመሠረተ ነው ፣ ግን ያለ ግሉኮስ ፣ ጉበት እና የሃይድሮሊክ ወተት። ካርቦሃይድሬትስ እና ፖሊሃይድሮሪክ አልኮሆል በ 0.5% ውስጥ ይጨምራሉ. የተጨመረው የአጋር መጠን 0.15% ነው. የአከባቢው pH 7.0 ነው. ጠቋሚው ክሎሮፌኖል ቀይ (0.004%) ነው. ጠቋሚው በ 1-2 ሚሊር ኤቲል አልኮሆል ውስጥ ይሟሟል እና ከማምከን በፊት ወደ መካከለኛው ውስጥ ይጨመራል. ክሎሮፌኖል ቀይ ከ 4.8-6.4 ፒኤች ክልል ውስጥ ከቀይ-ቫዮሌት ወደ ቢጫ ቀለም ሽግግር ይሰጣል.

ጉበት ማውጣት

ትኩስ የበሬ ጉበት በጥሩ ሁኔታ ተቆርጦ በውሃ የተሞላ ነው (1 ኪሎ ግራም ጉበት: 1 ሊትር ውሃ). ለ 30 ደቂቃዎች ቀቅለው እና ማጣሪያ ያድርጉ, ከዚያም በ 0.05 MPa ግፊት ለ 20 ደቂቃዎች ማምከን.

እሮብ 10

ለ 1 ሊትር ያልታሸገ የቢራ ዎርት (8% ዲኤም) ወይም 1 ሊትር እርሾ ውሃ ይጨምሩ, g: ማንጋኒዝ ሰልፌት 0.05, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.2, ሳይስቲን ወይም ሳይስቲን 0.2, ፖታሲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 2, ammonium citrate 0.2, acetate sodium 2.5, sucrose 20, pepton 10, እርሾ autolysate 50 ሚሊ. እያንዳንዱ አካል በተጠቀሰው ቅደም ተከተል በ malt wort (ለ ላክቶባሲለስ)ወይም የእርሾ ውሃ (ለ ሉኮኖስቶክ).በመጀመሪያው ሁኔታ የአከባቢው ፒኤች 5.5, በሁለተኛው - 6.0. 1.5% agar ይጨምሩ እና በሚፈስ የእንፋሎት ውሃ ያጠቡ። የጸዳ ኖራ ወደ ፔትሪ ምግቦች መጨመር ይቻላል.

በ 150 ሚሊ ሜትር የተጣራ የቲማቲም ጭማቂ, በሚሞቅበት ጊዜ 0.75 ml Tween-80 እና 37.5 g ግሉኮስ ይቀልጣሉ, 5 ml እርሾ autolysate, 600 ሚሊ ሜትር ስኪም ወተት (የተቀባ ወተት) እና 150 ሚሊ ሊትር የተቀላቀለ 2% ስጋ-ፔፕቶን አጋር ይጨምሩ. . ፒኤች ወደ 7.0 ተቀናብሯል። መካከለኛው ከ6-7 ሚሊ ሜትር በሆነ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ይፈስሳል ፣ በ 0.05 MPa ግፊት ለ 20 ደቂቃዎች sterilized ፣ ቀዝቀዝ ያለ ፣ በተጠናው የላቲክ አሲድ ባክቴሪያ እና 1-2 ሚሊ የቀለጡ 2% የስጋ-ፔፕቶን አጋር ከላይ ተሸፍኗል ። . ደካማ የጋዝ መፈጠርን በተመለከተ, ሶኬቱ ከዋናው መካከለኛ ይለያል, ጠንካራ ጋዝ ሲፈጠር, ከፍ ብሎ ይወጣል ወይም ከመሞከሪያ ቱቦ ውስጥ ይወጣል.

ንፋጭ የሚፈጥሩ ባክቴሪያዎችን ለማደግ ሚዲያ

አማራጭ 1.ከ 10% ሱክሮስ ጋር የስጋ አጋር.

አማራጭ 2.ቅንብር, g/l: ጥሬ ስኳር 40, ሶዲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 2, ሶዲየም ክሎራይድ 0.5, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.1, ferrous ሰልፌት 0.01, ካልሲየም ካርቦኔት 10, agar 20.

ረቡዕ Wittenbury

የሜዲካል ማከፊያው ግ / ሊ ያካትታል: ስጋ የማውጣት 5, pepton 5, እርሾ autolysate 50 (ወይም እርሾ የማውጣት 50), 1.6% bromocresol ሐምራዊ 1.4 ሚሊ, ፒኤች 6.8-7.0 መፍትሄ. በ 1 ቀን ልዩነት ውስጥ ለ 45 ደቂቃዎች 3 ጊዜ በሚፈስሰው የእንፋሎት ማምከን.

ብስባሽ አስፖሮጅኖስ ባክቴሪያዎችን ለማደግ ሚዲያ

ወተት አጋር

የተጣራ ወተት በ 5 ሚሊ ሜትር የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ይፈስሳል እና በሚፈስ የእንፋሎት ወይም በአውቶክላቭ ውስጥ ለ 20 ደቂቃዎች በ 0.05 MPa ግፊት ይጸዳል. በተናጠል, 3% የውሃ agar ያዘጋጁ, 4-5 ሚሊ ሜትር ወደ የሙከራ ቱቦዎች ያፈሱ እና በ 0.1 MPa ግፊት ለ 30 ደቂቃዎች ያጸዳሉ. የ agar ይቀልጣል, sterilely ከወተት ጋር ይጣመራሉ እና የሙከራ ናሙና ቀደም ተጨምሯል የት Petri ምግቦች ውስጥ ፈሰሰ.

ለስብ የሚፈጩ ባክቴሪያዎችን ለማደግ ሚዲያ

አማራጭ I.ለ 1 ሊትር ውሃ 5 g peptone እና 3 ml እርሾ autolysate ይጨምሩ. ፒኤች ከ7.2-7.4 ካገኘ በኋላ 1.5% agar ይጨምሩ። አጋር ይቀልጣል, መካከለኛው ተጣርቶ 1% ትኩስ ወተት ስብ ወይም የወይራ ዘይት ይጨመራል. ቅልቅል, ወደ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ አፍስሱ እና በ 0.1 MPa ግፊት ለ 15 ደቂቃዎች ማምከን.

አማራጭ 2. 2-4% የወተት ስብ ወይም የወይራ ዘይት ወደ ስጋ peptone agar ይጨመራል. 10 ሚሊ ሜትር ወደ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ አፍስሱ እና በ 0.1 MPa ግፊት ለ 20 ደቂቃዎች ማምከን. ወደ ኩባያዎቹ ከመጨመራቸው በፊት መካከለኛውን በደንብ ያናውጡት.

የእንደዚህ አይነት መካከለኛ ምሳሌ ጄልቲን በሃይድሮሊክ ወተት ነው. 10% ጄልቲን በሃይድሮሊዝድ ወተት ውስጥ ይጨመራል (በሃይድሮሊዝድ ካሴይን ወይም በስጋ የሚወጣ ሾርባ መጠቀም ይችላሉ) በ 50 ዲግሪ ሴንቲግሬድ የሙቀት መጠን እንዲሞቅ እና እንዲሞቅ ያድርጉት. የአከባቢው pH 7.0-7.2 ነው. መካከለኛው ተጣርቶ በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ በ 0.075 MPa ግፊት ለ 20 ደቂቃዎች ይጸዳል.

አሴቲክ አሲድ ባክቴሪያዎችን ለማሳደግ ሚዲያ

ወደ ብቅል ዎርት ወይም ጎመን መካከለኛ 4 ቮል. % ኤቲል አልኮሆል እና 20 ዩኒት / ሚሊ ሜትር አንቲባዮቲክ ሞኖማይሲን, ይህም የላቲክ አሲድ ባክቴሪያ እድገትን ይከላከላል.

አናሮብስን ለማደግ ሚዲያ

Winogradsky ረቡዕ.በ 1 ሊትር ፈሳሽ ውሃ ይቀልጣሉ, g: ፖታሲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት 1, ማግኒዥየም ሰልፌት 0.5, ማንጋኒዝ ሰልፌት 20, ግሉኮስ 20, ሶዲየም ክሎራይድ እና ፌሪክ ክሎራይድ - መከታተያዎች.

እሮብ ኪታ-ታሮዚ.የስጋ ቁርጥራጭ ጉበት ወይም ስጋ የተቀቀለ እና በውሃ ታጥቦ ወደ መሞከሪያ ቱቦ ውስጥ ይወርዳሉ ስለዚህም ከታች ይሸፍኑ. የስጋ-ፔፕቶን መረቅ ከ 1% ግሉኮስ (pH 7.2-7.4) ጋር ወደ "/ 2 ጥራዞች የሙከራ ቱቦውን አፍስሱ እና ተንሳፋፊውን ዝቅ ያድርጉት። 1 ሴ.ሜ ቁመት ያለው የቫዝሊን ዘይት ንብርብር በላዩ ላይ ያፈሱ። በ 0.1 ግፊት ለ 15 ደቂቃዎች ያፍሱ። MPa 2 ጊዜ በየተወሰነ ጊዜ 30 ደቂቃ።

ሃይድሮጂን ሰልፋይድ የሚያመነጩ ቴርሞፊል አናሮብስ ለማደግ መካከለኛ

የመሃከለኛውን ስብስብ ያካትታል, g / l: peptone 10, ferrous sulfate 1, agar 20. ከመሙላቱ በፊት, ንጹህ የብረት ጥፍር በእያንዳንዱ የሙከራ ቱቦ ውስጥ ይቀመጣል. ስኳሩን ከተዘራ በኋላ, የተጣራ ፔትሮሊየም ጄሊ ንብርብር ወደ የሙከራ ቱቦ ውስጥ ይፈስሳል. ስኳር ሃይድሮጂን ሰልፋይድ የሚያመነጩ ባክቴሪያዎችን ከያዘ, የባህሪ ጥቁር ቅኝ ግዛቶች በአጋር ውስጥ ይመሰረታሉ.

እንደ ዓላማቸው ዓላማ መሠረት, የንጥረ-ምግብ መገናኛ ዘዴዎች በሚከተሉት ዋና ዋና ምድቦች ይከፈላሉ.

ሁለንተናዊ- ብዙ አይነት በሽታ አምጪ እና በሽታ አምጪ ተህዋሲያን በደንብ የሚያድጉበት ሚዲያ። እነዚህም የሚከተሉትን ያጠቃልላሉ-የስጋ-ፔፕቶን ሾርባ (MPB = የስጋ ውሃ + 1% peptone + 0.5% NaCl), ስጋ-ፔፕቶን አጋር (MPA = MPB + 2-3% agar).

ልዩነት ምርመራ- አንድን የባክቴሪያ ዝርያ ከሌሎች በኢንዛይም እንቅስቃሴ ወይም በባህላዊ መገለጫዎች ለመለየት የሚያስችል ሚዲያ። እነዚህም Endo, Levin, Ploskirev, Gissa እና ሌሎች ብዙ ያካትታሉ.

መራጭ(ተመሳሳይ ቃላት፡ መራጭ፣ መራጭ፣ ማበልጸጊያ) - በተወሰኑ ዓይነቶች ረቂቅ ተሕዋስያን ጥቅም ላይ የሚውሉ ንጥረ ነገሮችን የያዙ ሚዲያዎች የማይጠቅሙ አልፎ ተርፎም የሌሎች ረቂቅ ተሕዋስያን እድገትን ይከላከላል። የሚመረጡ ሚዲያዎች በጥናት ላይ ከሚገኙት ቁሳቁሶች ውስጥ የተወሰኑ የባክቴሪያ ዓይነቶችን በተለይ ለመምረጥ ያስችላሉ. ይህ ሙለር, ሴሌኒት, ራፖፖርት, 1% የፔፕቶን ውሃ, ወዘተ.

ልዩነት - የተመረጠ- የልዩነት ምርመራ እና የተመረጡ አካባቢዎችን ባህሪያት የሚያጣምሩ አካባቢዎች። እነሱ በተለይም የኢንትሮባክቴሪያ እና pseudomonads (የሲቮሎድስኪ አካባቢ) ሰፊ ስርጭት ያላቸውን ተህዋሲያን ለይቶ ለማወቅ እና ለመለየት ጥቅም ላይ ይውላሉ።

ልዩ- በሁለንተናዊ ሚዲያ ላይ የማይበቅሉ ወይም በደንብ የማይበቅሉ ባክቴሪያዎችን እድገት ለማግኘት በልዩ ሁኔታ የተዘጋጀ ሚዲያ። እነዚህም ማኮይ-ቻፒን ሚዲያ (የቱላሪሚያ መንስኤ የሆነውን እድገት ለማግኘት)፣ የደም ኤምፒኤ (የበሽታ አምጪ ስቴፕቶኮከስ እድገትን ለማግኘት)፣ Lowenstein-Jensen መካከለኛ (የሳንባ ነቀርሳ መንስኤን ለመለየት) ወዘተ.

ሰው ሰራሽ- የካርቦን ወይም ናይትሮጅን ምንጭ ሆነው የሚያገለግሉ ኬሚካላዊ ውህዶች በመጨመር የኢ-ኦርጋኒክ ጨዎችን መፍትሄዎች የሆኑ በጥብቅ የተገለጸ ኬሚካዊ ስብጥር ሚዲያ። የዚህ ዓይነቱ ሰው ሰራሽ መካከለኛ ምሳሌ አነስተኛው መካከለኛ M-9 ነው ፣ እሱም የኃይል እና የካርቦን ምንጭ ግሉኮስ ፣ እና ናይትሮጂን NH4C1 ነው። የተለያዩ አሚኖ አሲዶች, መሠረቶች እና ቫይታሚኖች በማካተት የተዋሃዱ ሚዲያዎች የበለጠ ውስብስብ ቅንብር ሊሆኑ ይችላሉ.

ከፊል-ሰው ሠራሽ- ሰው ሰራሽ ሚዲያ ይህም ከተፈጥሮ ምንጭ የሆነ የተወሰነ ምርት የሚጨመርበት ለምሳሌ የደም ሴረም። ለሚመለከታቸው የባክቴሪያ ዓይነቶች እና የምርመራ ዓላማዎች ፍላጎት ለማሟላት የተነደፉ ብዙ የተለያዩ የባህል ሚዲያ አማራጮች አሉ።

የ a4 ያልተመሳሰለ ኤሌክትሪክ ሞተር የፍጥነት ማስተካከያ የማያስፈልጋቸው ስልቶችን (አድናቂዎች ፣ ጭስ ማውጫዎች ፣ ፓምፖች) ለማሽከርከር የተነደፈ ነው። የ A4 ተከታታይ ሞተሮችን ልዩ ባህሪያት እና ባህሪያቸውን በ ላይ ማወቅ ይችላሉ

በማይክሮባዮሎጂ ውስጥ ያሉ የንጥረ-ምግብ ሚዲያዎች ረቂቅ ተሕዋስያን እና የቲሹ ባህሎች የሚበቅሉባቸው ንጥረ ነገሮች ናቸው። ለምርመራ ዓላማዎች, ጥቃቅን ተሕዋስያንን ማግለል እና ንጹህ ባህሎችን ማጥናት, ክትባቶችን እና መድሃኒቶችን ማምረት እና ለሌሎች ባዮሎጂካል, ፋርማሲዩቲካል እና የህክምና ዓላማዎች ጥቅም ላይ ይውላሉ.

የማይክሮባዮሎጂ ባህል ሚዲያ ምደባ

በማይክሮባዮሎጂ ውስጥ የንጥረ-ምግብ ሚዲያዎች በሚከተሉት ተከፍለዋል-
- የተወሰነ እና ያልተወሰነ ጥንቅር አከባቢዎች;
- ተፈጥሯዊ, ከፊል-ሠራሽ እና ሰው ሠራሽ;
- መሰረታዊ, የምርመራ, የተመረጠ;
- ጥቅጥቅ ያለ ፣ ከፊል ፈሳሽ ፣ ፈሳሽ ፣ ደረቅ ፣ ጥራጥሬ።

የተፈጥሮ ንጥረ ነገር ሚዲያዎች ከተፈጥሮ ቁሳቁሶች የተገኙ ናቸው-ደም, ስጋ, ፕሮቲኖች, የእንስሳት አካላት, የእጽዋት ምርቶች እና የእፅዋት ቁሳቁሶች. የእንደዚህ አይነት ሚዲያ ምሳሌዎች የስጋ መረቅ፣ ዋይ፣ ቢራ ዎርት፣ ድርቆሽ መረቅ፣ አጋር-ጋር፣ ደም እና ይዛወር። ተፈጥሯዊ አከባቢዎች በእርግጠኝነት ያልተረጋገጠ ስብጥር ያላቸው አካባቢዎችን ያመለክታሉ, ይህም በተለያየ ጊዜ ውስጥ የተለያየ መጠን ያላቸው የተወሰኑ ክፍሎች ሊኖሩት ይችላል.

ከፊል-ሰው ሠራሽ ሚዲያም እርግጠኛ ያልኾነ ቅንብር እንደ ሚዲያ ይቆጠራሉ። እነሱ የሚዘጋጁት በተፈጥሯዊ ንጥረ-ምግብ ሚዲያዎች ላይ ነው, ነገር ግን ሰብሎችን በንቃት መራባትን የሚያረጋግጡ ንጥረ ነገሮች ተጨምረዋል. ለኢንዱስትሪ ፋርማሲዩቲካል መድሐኒቶች ቪታሚኖችን፣ አሚኖ አሲዶችን እና አንቲባዮቲኮችን ለማምረት ከፊል ሰው ሠራሽ ሚዲያ ላይ ሰብሎች ይበቅላሉ።

ሰው ሰራሽ ሚዲያ የሚዘጋጀው ከሚታወቀው ቅንብር ንጥረ ነገሮች፣ በሚታወቁ ጥራዞች እና ሬሾዎች ነው፣ ስለዚህ እነዚህ ሚዲያዎች የአንድ የተወሰነ ጥንቅር ሚዲያ ናቸው። በእነሱ እርዳታ ረቂቅ ተሕዋስያንን መለዋወጥ, ባዮሎጂካል እና ፊዚዮሎጂያዊ ባህሪያትን እና እድገታቸውን የሚጨቁኑ ወይም በተቃራኒው እድገታቸውን የሚያነቃቁ ንጥረ ነገሮችን የማግኘት እድል ያጠናል.

መሰረታዊ፣ ተመራጭ እና የምርመራ ባህል ሚዲያ

መሰረታዊ ሚዲያዎች ለተለያዩ ረቂቅ ተህዋሲያን ባህሎች ለማደግ ጥቅም ላይ ይውላሉ, እንዲሁም የምርጫ እና የመመርመሪያ ሚዲያዎችን ለማግኘት መሰረት ናቸው. መሰረታዊ ሚዲያ ለምሳሌ የስጋ መረቅ፣ የስጋ አጋር፣ ዎርት እና ሆቲንግ መረቅን ያካትታሉ። ለተለያዩ ሰብሎች እድገትን ለማነቃቃት አንዳንድ አካላት ወደ መሰረታዊ ሚዲያዎች ይታከላሉ - እነዚህ ቪታሚኖች ፣ አሚኖ አሲዶች እና ተፈጥሯዊ ተዋጽኦዎች ሊሆኑ ይችላሉ። ስለዚህ, ደረቅ ሳል የመነጨ ወኪል በደም መጨመር መካከለኛ ላይ ይበቅላል.

የተመረጠ ሚዲያ - ባዮሎጂያዊ ሰብሎችን ለመምረጥ (ተመራጭ) ለማልማት ሚዲያ. የመካከለኛው ጥንቅር የተመረጠው ለአንድ ዝርያ ወይም በቅርብ ተዛማጅነት ላለው የባክቴሪያ ቡድን ተስማሚ እንዲሆን እና የሌሎች ዝርያዎች ባክቴሪያዎችን እድገት ለማፈን ነው. ለምሳሌ, ሶዲየም ክሎራይድ ወደ መካከለኛ መጨመር በተወሰነ ትኩረት ውስጥ ከስታፊሎኮኪ በስተቀር ሁሉንም ባክቴሪያዎች እድገትን ይከለክላል. በተመረጡ ሰብሎች እርዳታ ንጹህ ባህሎች ለቀጣይ ስርጭት እና ክምችት ይገኛሉ.

የምርመራ ዘዴዎች ረቂቅ ተሕዋስያንን ለመለየት ጥቅም ላይ ይውላሉ. በመካከለኛው እና በኬሚካላዊ ውህደቱ ላይ ለውጦች (የመሃከለኛ ቀለም ለውጦች, የጋዝ አረፋዎች ገጽታ, ወዘተ) ላይ በመመርኮዝ የባክቴሪያው አይነት ይወሰናል. እንደ ክሪስታል ቫዮሌት, ማላቺት አረንጓዴ, ሜቲሊን ሰማያዊ, ፉሲን እና ሌሎች የመሳሰሉ የኬሚካል አመላካች ማቅለሚያዎች ብዙውን ጊዜ እንደዚህ ባሉ ሚዲያዎች ውስጥ ይጨምራሉ. የቅርብ ባህሎችን ለመለየት ይረዳሉ. ለምሳሌ, በሮዝ ኢንዶ መካከለኛ, በፉሲን ቀለም, ኢ. ኮላይ ቀይ ቅኝ ግዛቶችን ይመሰርታል, እና የባክቴሪያ ታይፎይድ እና ተቅማጥ ቅኝ ግዛቶች ቀለም የሌላቸው ናቸው.

የንጥረ-ምግብ መገናኛ ዘዴዎች ረቂቅ ተሕዋስያንን ለማከማቸት, ለማግለል, ለማጥናት እና ለመጠበቅ የታቀዱ ናቸው. ሰው ሰራሽ ንጥረ ነገር ሚዲያን በሚዘጋጅበት ጊዜ ለሕይወት አስፈላጊ ለሆኑ ንጥረ ነገሮች ጥቃቅን ተህዋሲያን ፍላጎቶች እና በሴል እና በአካባቢው መካከል ሊለዋወጡ የሚችሉበት የፊዚዮኬሚካላዊ ሁኔታዎች ግምት ውስጥ ይገባል ።

የተለያዩ የማይክሮባይል ሜታቦሊዝም ዓይነቶችን ለማረጋገጥ የንጥረ ነገሮች ሚዲያ የሚከተሉትን መስፈርቶች ማሟላት አለባቸው።

• 1. ሴሉ የተገነባባቸውን ሁሉንም ንጥረ ነገሮች ይዘዋል: ማክሮ ኤለመንቶች (ካርቦን, ናይትሮጅን, ኦክሲጅን, ድኝ, ፎስፈረስ, ፖታሲየም, ካልሲየም, ማግኒዥየም, ብረት) እና ማይክሮኤለመንት (ማንጋኒዝ, ሞሊብዲነም, ዚንክ, መዳብ, ኮባልት, ኒኬል, ቫናዲየም, ክሎሪን, ሶዲየም, ሲሊከን, ወዘተ). ሁሉም ንጥረ ነገሮች በአንድ የተወሰነ ረቂቅ ተሕዋስያን ሊፈጩ በሚችሉ ውህዶች ውስጥ መሆን አለባቸው። የካርቦን ምንጭ የተለያዩ የኦርጋኒክ ውህዶች ሊሆኑ ይችላሉ-ካርቦሃይድሬትስ ፣ ፖሊሃይዲሪክ አልኮሆል ፣ ኦርጋኒክ አሲዶች ፣ አሚኖ አሲዶች ፣ ፕሮቲኖች ፣ ወዘተ የናይትሮጅን ምንጭ አሞኒየም ውህዶች ፣ አሚኖ አሲዶች ፣ peptides ፣ ፕሮቲኖች ናቸው። የተቀሩት ማክሮ ኤለመንቶች ምንጭ ኦርጋኒክ ያልሆኑ ውህዶች ናቸው - የፎስፈረስ እና ሌሎች አሲዶች ጨው። ማይክሮኤለመንቶች ከኦርጋኒክ ማዳበሪያዎች, ጨዎችን እና ውሃ ጋር ወደ ንጥረ ነገር ውስጥ ይገባሉ. ቪታሚኖች (በተለይ የቡድን B) እና ሌሎች የእድገት ምክንያቶች እንደ ኦርጋኒክ ንጥረ ነገሮች አካል ወይም በንጹህ ንጥረ ነገሮች መልክ ወደ መካከለኛው ውስጥ ይጨምራሉ.
• 2. በቂ እርጥበት (ቢያንስ 20% ውሃ) ይኑርዎት.
• 3. በመካከለኛው ውስጥ ያለው የጨው ክምችት isotonicity ማረጋገጥ አለበት, ማለትም. በማይክሮባላዊ ሴል ውስጥ ካለው የጨው ክምችት ጋር ይዛመዳል (ለአብዛኛዎቹ ረቂቅ ተሕዋስያን - 0.5% ፣ halophilic - 3%)።
• 4. የመካከለኛው የሃይድሮጂን ions (pH) ትኩረት ለሚበቅለው ረቂቅ ተሕዋስያን ተስማሚ መሆን አለበት (የፒኤች ክልል 4.5-8.5)።
• 5. የመካከለኛው ኦክሳይድ-መቀነሻ አቅም (ኢህ) ከተህዋሲያን ፍላጎቶች ጋር መዛመድ አለበት-ለአናኢሮብስ - 0.120-0.060 V, ለኤሮብስ - ከ 0.080 V.
• 6. የንጥረ ነገር መካከለኛ የጸዳ መሆን አለበት.

የንጥረ-ምግብ ሚዲያዎች ስብስብ ሰው ሠራሽ ወይም ተፈጥሯዊ ሊሆን ይችላል. በተደነገገው መጠን ውስጥ በኬሚካላዊ ንጹህ ውህዶች ብቻ ከያዙ የንጥረ-ምግብ ሚዲያዎች ሰው ሰራሽ ናቸው። የእነሱ ጥንቅር ሙሉ በሙሉ ይታወቃል. የእንደዚህ አይነት አከባቢዎች ጥቅማጥቅሞች መደበኛነት እና እንደገና መወለድ ናቸው. ይሁን እንጂ ሰው ሠራሽ ሚዲያ የሚገኘው ለጥቂት በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ብቻ ነው። እነሱ በዋነኝነት ጥቅም ላይ የሚውሉት ለማይክሮባላዊ ሜታቦሊዝም ለሙከራ ጥናቶች ነው።

የተፈጥሮ አካባቢዎች ለተግባራዊ ምርምር በስፋት ጥቅም ላይ ይውላሉ. የተፈጥሮ (ተፈጥሯዊ) ንጥረ-ምግብ ሚዲያ የእንስሳት እና የእፅዋት መነሻ ምርቶችን ያቀፈ እና እርግጠኛ ያልሆነ ኬሚካላዊ ስብጥር አላቸው።

አጠቃላይ ዓላማ የንጥረ-ምግብ ሚዲያ (ሁለንተናዊ) እና ልዩ የንጥረ-ምግብ ሚዲያዎች አሉ። የአጠቃላይ ዓላማ የንጥረ-ምግቦች ሚዲያዎች ብዙ ዓይነት ረቂቅ ተሕዋስያንን ለማልማት እና ልዩ ንጥረ-ምግቦችን ለማዘጋጀት እንደ መሰረት ሆነው ያገለግላሉ. እነዚህም ለምሳሌ የስጋ-ማስወጫ መረቅ, የስጋ-ማስወጣት agar, Hottinger broth, Hottinger agar እና ሌሎችም ያካትታሉ. ልዩ የንጥረ-ምግብ መገናኛ ብዙሃን ለተወሰኑ ረቂቅ ተሕዋስያን ዓይነቶች ለመምረጥ የተነደፉ ናቸው, ንብረታቸውን እና ማከማቻቸውን በማጥናት.

የሚከተሉት የልዩ ሚዲያ ዓይነቶች አሉ-ተመራጭ (ተመራጭ) ፣ ልዩነት ምርመራ ፣ ተጠባቂ። ለተወሰኑ ጥቃቅን ተህዋሲያን የንጥረ-ምግቦችን መምረጥ የሚቻለው ለእነሱ ምቹ ሁኔታዎችን በመፍጠር ነው (pH, Eh, የጨው ክምችት, የንጥረ ነገር ስብጥር), ማለትም. አዎንታዊ ምርጫ ወይም ሌሎች ማይክሮቦች (ቢል, ሶዲየም አዚድ, ፖታስየም ቴልዩራይት, አንቲባዮቲክስ, ወዘተ) የሚከለክሉ ንጥረ ነገሮችን ወደ አካባቢው በመጨመር, ማለትም. አሉታዊ ምርጫ. የንጥረ-ምግቦች ልዩነት ባህሪያት የሚፈጠሩት የማይክሮቦች (ለምሳሌ, ስኳር, አሚኖ አሲዶች) እና ተጓዳኝ ጠቋሚዎች (ለምሳሌ, ፒኤች አመልካቾች - bromothymol blau, fuchsin; Eh ጠቋሚዎች) የሚወሰንበትን አንድ ንጣፍ በመጨመር ነው.

ወጥነት ባለው መልኩ የንጥረ-ምግብ ሚዲያዎች ፈሳሽ, ከፊል-ፈሳሽ (0.2-0.7% agar) እና ጥቅጥቅ ያሉ (1.5-2% agar) ሊሆኑ ይችላሉ. በኢንዱስትሪ የሚመረተው ደረቅ ባህል ሚዲያ የሚዲያ ጥበቃ ዓይነት ነው።

ረቂቅ ተሕዋስያንን ባዮኬሚካላዊ ለመለየት የማይክሮ ቮልዩም ቴክኖሎጂን ለማቅረብ የንግድ ማይክሮቴስት ስርዓቶች ይመረታሉ። እነሱ በሁለት ቡድኖች የተወከሉ ናቸው, በአስተያየቱ ይዘት ውስጥ ይለያያሉ: 1 - በንጥረ ነገር መካከለኛ; 2 - በአገልግሎት አቅራቢው አብነት ውስጥ. የመጀመርያው ቡድን የሙከራ ስርአቶች ከፖይቪኒል አልኮሆል ጋር ተረጋግተው በፖይቪኒል አልኮሆል የተረጋጉትን የ polystyrene ሳህኖች በማይክሮቮልዩም ጉድጓዶች ለምሳሌ ኤፒአይ-20E፣ Enterotest (ምስል 3.5)፣ የቤት ውስጥ ፒቢዲኢ እና MMTE 1 እና E2 ይይዛሉ።

ሩዝ. 3.5.

የሁለተኛው ቡድን የሙከራ ስርዓቶች በወረቀት ወይም በፖሊመር ተሸካሚ አብነት ውስጥ ንጣፍ እና አመላካች አላቸው ፣ ለምሳሌ ማይክሮ-አይዲ ፣ ሚኒቴክ። በፈሳሽ ልዩነት ማህደረ መረጃ ላይ የተመሰረቱ የሙከራ ስርዓቶችም ተዘጋጅተዋል, ይህም በቀጥታ በቤተ ሙከራ ውስጥ ሊፈጠር ይችላል. ባዮኬሚካላዊ ፈተና ውጤቶች ላይ የተመሠረተ, mykroorhanyzm አይነት ustanovlennыe መታወቂያ ጠረጴዛዎች, analytycheskyh ካታሎግ ኮዶች ወይም መሣሪያዎች ባዮኬሚካላዊ መለየት mykroorhanyzmы ለ ሰር mykrobolohycheskye ስርዓቶች. በምርምር መፋጠን እና ከፍተኛ ቅልጥፍና ምክንያት የማይክሮ ቮልዩም የሙከራ ስርዓቶች በቤተ ሙከራ ውስጥ በስፋት ጥቅም ላይ ይውላሉ።

ለተፈጥሮ ንጥረ ነገር ሚዲያ የእንስሳት, የእፅዋት እና ጥቃቅን ምርቶች ጥቅም ላይ ይውላሉ: ስጋ, የዓሳ ምግብ, ወተት, እንቁላል, ደም, ድንች, እርሾ, ወዘተ ... ከፊል የተጠናቀቁ ምርቶች ከነሱ ይዘጋጃሉ: ውስጠቶች እና ጭረቶች (የስጋ ውሃ, እርሾ ማውጣት). , ኢንዛይማቲክ እና አሲድ ሃይድሮላይዜስ (ፔፕቶን, ሆትቲንግር ዳይጄስት, ኬዝቲን ዲጀስት, ወዘተ). መረቅ እና ተዋጽኦዎች የእድገት ምክንያቶች ምንጭ ናቸው, hydrolysates የአሚኖ አሲዶች እና ሌሎች ኦርጋኒክ ንጥረ ነገሮች ምንጭ ናቸው.

አጋር-አጋር ወይም ጄልቲን ለምግብ ሚዲያዎች እንደ ማሸጊያነት ያገለግላል. አጋር-አጋር ከባህር አረም የተገኘ ፖሊሶካካርዴድ ነው. በ 80-86 ዲግሪ ሴንቲግሬድ እና በ 40-45 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ በሚቀልጥ ውሃ ውስጥ ጄል መፍጠር ይችላል; በአብዛኛዎቹ ረቂቅ ተሕዋስያን ዓይነቶች አልተከፋፈለም። Gelatin ከቆዳ እና ከአጥንት የተገኘ ፕሮቲን ነው; ጄልቲን ጄል በ 32-34 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ይቀልጣል, ጄል በ26-28 ° ሴ (ማለትም በ 37 ዲግሪ ሴንቲግሬድ የሙቀት መጠን በፈሳሽ ሁኔታ ውስጥ ነው); በብዙ ዓይነት ረቂቅ ተሕዋስያን የተከፋፈለ። ስለዚህ, ጄልቲን በጣም አልፎ አልፎ ጥቅም ላይ ይውላል.

አስፈላጊ ከሆነ የንጥረ-ምግብ ማእከላዊው በዶሮ እንቁላል ነጭ, በሱፍ ወይም በዝናብ በማከም ይገለጻል. መካከለኛውን ወደ ጠርሙሶች, ጠርሙሶች እና የሙከራ ቱቦዎች ያፈስሱ. መካከለኛው በ 120 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ውስጥ እንዲጸዳ ከተፈለገ ንጹህ እና ንጹህ ያልሆኑ መያዣዎችን ይጠቀሙ, ወይም መካከለኛው በሚፈስ የእንፋሎት (100 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ) ወይም በ 112 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ማምከን የሚያስፈልገው ከሆነ. መያዣውን ከመገናኛው ጋር በጥጥ-ጋዝ ማቆሚያዎች እና በወረቀት መያዣዎች ይዝጉ. በመካከለኛው ስብጥር ላይ ተመስርተው በተለያዩ መንገዶች ይጸዳሉ. ካርቦሃይድሬትስ እና ቤተኛ ፕሮቲን እንዲሁም ሰው ሰራሽ ሚዲያ የሌላቸው የአጋር ሚዲያዎች በ115-120 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ባለው የሙቀት መጠን ለ15-20 ደቂቃዎች በአውቶክላቭ ውስጥ ማምከን አለባቸው። ካርቦሃይድሬትስ፣ ወተት፣ ጄልቲንን የያዙ ሚዲያዎች በ100 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ክፍልፋዮች ወይም በአውቶክላቭ በ112 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ለ15 ደቂቃ በሚፈስሰው የእንፋሎት ውሃ ይጸዳሉ። ቤተኛ ፕሮቲን እና ዩሪያን የያዙ ሚዲያዎች በማጣራት ማምከን ወይም የጸዳ አካላት (ደም፣ ሴረም፣ ወዘተ) ወደ መካከለኛው የጸዳ መሠረት ላይ ተጨምረዋል። ዝግጁ የሆነ የንጥረ ነገር ሚድያ በሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ በ37 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ውስጥ ለ1-3 ቀናት እንዲቆይ በማድረግ የፅንስ ቁጥጥር ይደረግባቸዋል።

በመስክ ላይ, ከደረቁ (የታሸጉ) ንጥረ-ምግቦችን (ንጥረ-ምግቦችን) የንጥረ-ምግቦችን ማዘጋጀት ቀላል ነው. በመለያው ላይ የተመለከተው ደረቅ መካከለኛ ናሙና በተጣራ ወይም በቧንቧ ውሃ ውስጥ ይጨመራል እና ዱቄቱ ሙሉ በሙሉ እስኪፈርስ ድረስ ያበስላል. ከዚያም መካከለኛው በማይጸዳ ጠርሙሶች እና በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ይፈስሳል እና ይጸዳል. አንዳንድ ሚዲያዎች (ለምሳሌ Endo, Ploskireva, Levin) ያለ ማምከን መጠቀም ይቻላል.

ሁሉም ተከታታይ በኢንዱስትሪ የሚመረቱ ንጥረ-ምግቦች እና በቤተ ሙከራ ውስጥ የሚዘጋጁ ሁሉም የመገናኛ ብዙሃን ቡድኖች በባክቴሪያ ቁጥጥር ስር ናቸው። የተለመዱ ወይም አካባቢያዊ የባክቴሪያ ዓይነቶች, በሁሉም ረገድ የተለመዱ, ለስላሳ መልክ, እንደ የሙከራ ባህሎች ጥቅም ላይ ይውላሉ. የሚከተሉት የንጥረ ነገሮች መካከለኛ ባዮሎጂያዊ አመላካቾች ተወስነዋል-ስሜታዊነት (እድገት), የመከልከል ባህሪያት, የመለየት ባህሪያት, በመካከለኛው ላይ የባክቴሪያ እድገት ፍጥነት, መራባት.

የንጥረ ነገሮች መካከለኛ ትብነት የሚወሰነው በመካከለኛው ላይ የቅኝ ግዛት እድገት መከሰቱን በሚያረጋግጡ የባክቴሪያዎች ቅኝ-መፈጠራቸው አሃዶች (CFU) ዝቅተኛው ብዛት ወይም ከ 10 ዩኒቶች የመነሻ ማጎሪያ ባህል ከፍተኛው አስር እጥፍ ነው። ብጥብጥ (በኦፕቲካል ቱርቢዲቲ መስፈርት መሰረት), በሁሉም የተከተቡ የፔትሪ ምግቦች ላይ የባክቴሪያ እድገት መኖሩን ማረጋገጥ. የሜዲካል ማገጃው ባህሪያት የሚገመገሙት በ CFU ውስጥ ባለው inoculum መጠን ፣ በመካከለኛው ላይ ሙሉ በሙሉ ተጨምቆ ፣ ወይም የበቀሉት የባክቴሪያ ቅኝ ግዛቶች ብዛት እና ከተገመቱት የተከተቡ ተህዋሲያን ማይክሮፋሎራዎች የመጨቆን መጠን ይገመገማሉ። የመገናኛ ብዙሃን ልዩነት ባህሪያት የሚመረመሩት የባክቴሪያዎችን የፈተና ዝርያዎች ከተባባሪዎች ጋር በመከተብ ነው, ከዚያም የተፈለገውን የባክቴሪያ ቅኝ ግዛቶች ከተባባሪዎች የመለየት ግልጽነት ይወሰናል. የመካከለኛው የመለያ ባህሪ ልዩነት የሚገለጠው ይህ ንብረት ከሌሎች የባክቴሪያ ዓይነቶች በሌለበት ነው, ከሚያስፈልጉት በስተቀር. በመካከለኛው ላይ ያለው የባክቴሪያ እድገት የሚወሰነው በእጽዋት ዝቅተኛው የመታቀፊያ ጊዜ (በሰዓታት) ነው, በዚህ ጊዜ በአይን የሚታይ ግልጽ የባህል እድገት (ለተመረጠው ሚዲያ) ወይም የተለመዱ ልዩ ባህሪያት ያላቸው ቅኝ ግዛቶች መፈጠር ነው. የተረጋገጠ. የመገናኛ ብዙኃን ባዮሎጂካል መለኪያዎች እንደገና መባዛት የሚገመገመው በተመሳሳዩ የውጤቶች ድግግሞሽ (በ%) ሚዲያዎች ከተመሳሳዩ የባክቴሪያ ዓይነቶች ጋር እንደገና ጥቅም ላይ ሲውሉ ነው። ለባዮሎጂካል አመላካቾች የተለያዩ የንጥረ-ምግብ ሚዲያዎች ቁጥጥር የሚከናወነው በተወሰኑ ዘዴዎች እና ደረጃዎች መሰረት ነው, በኦፊሴላዊ ሰነዶች ይመራል.

በላብራቶሪ ልምምድ ውስጥ የንጥረ-ምግብ ሚዲያን የፊዚኮ-ኬሚካላዊ ቁጥጥር በ pH, hH እና amine ናይትሮጅን ይዘት ውስጥ ይካሄዳል. ሌሎች አመላካቾች አብዛኛውን ጊዜ በንጥረ-ምግብ ሚዲያዎች ኢንዱስትሪ ውስጥ ይመረታሉ. የሚዲያውን ፒኤች እና ኤችኤች ለመወሰን ፒኤች ሜትሮች፣ ጠቋሚ ወረቀቶች እና የተለያዩ የኬሚካል ፒኤች እና የ hH አመላካቾች ወደ ንጥረ-ምግብ ሚዲያው የተጨመሩ ናቸው። የአሚን ናይትሮጅን ይዘት በ GOST መሠረት በፒኤች-ሜትሪክ ፎርሞል የንጥረ-ምግቦች ዘዴ ዘዴ ያጠናል.

በተናጥል ረቂቅ ተሕዋስያን ባዮኬሚካላዊ ባህሪያት ላይ ጥናት በሦስተኛው ደረጃ ላይ ይካሄዳል. በአጋር ስላንት ላይ የሚበቅሉት ረቂቅ ተሕዋስያን ባሕል ንፅህናን በአጉሊ መነጽር በግራም ቀለም በተቀባ ስሚር ይጣራል። በአጉሊ መነጽር ሲታይ, ለጥቃቅን ህዋስ ቅርፅ, መጠን እና ቦታ ትኩረት ይሰጣል. ልዩ እድፍ ስፖሮች, እንክብልና, inclusions እና ፍላጀለም ለመለየት ጥቅም ላይ ይውላሉ.

ለሰብል መለያ, ለምሳሌ. የባክቴሪያ ዓይነቶችን እና ዓይነቶችን ማቋቋም ፣ ከሥነ-ሥርዓታዊ እና ባህላዊ ባህሪዎች በተጨማሪ ባዮኬሚካል ፣ አንቲጂኒክ እና ሌሎች ንብረቶችን ያጠናል ።

የማይክሮባዮሎጂ ጥናት ረቂቅ ተሕዋስያን ንፁህ ባህሎች ማግለል ፣ ማልማት እና ንብረቶቻቸውን ማጥናት ነው። ተመሳሳይ ዝርያ ያላቸው ረቂቅ ተሕዋስያን ያካተቱ ባህሎች ንጹህ ይባላሉ. በተላላፊ በሽታዎች ምርመራ, ረቂቅ ተሕዋስያን ዝርያዎችን እና ዓይነቶችን ለመወሰን, በምርምር ስራዎች, ረቂቅ ተህዋሲያን (መርዞች, አንቲባዮቲክስ, ክትባቶች, ወዘተ) ቆሻሻዎችን ለማግኘት ያስፈልጋሉ.

ረቂቅ ተሕዋስያንን ለማልማት (በሰው ሠራሽ ሁኔታዎች ውስጥ በብልቃጥ ውስጥ ማልማት) ልዩ ንጣፎች ያስፈልጋሉ - የንጥረ-ምግብ ሚዲያ። በመገናኛ ብዙሃን ረቂቅ ተሕዋስያን ሁሉንም የሕይወት ሂደቶች ያከናውናሉ (መብላት ፣ መተንፈስ ፣ ማባዛት ፣ ወዘተ) ፣ ለዚህም ነው የእርሻ ሚዲያ ተብለው ይጠራሉ ።

የባህል ሚዲያ

የባህል ሚዲያዎች የማይክሮባዮሎጂ ሥራ መሠረት ናቸው ፣ እና ጥራታቸው ብዙውን ጊዜ የጥናቱ ውጤት ይወስናል። አከባቢዎች ለማይክሮቦች ህይወት ምቹ (ምርጥ) ሁኔታዎችን መፍጠር አለባቸው።

የአካባቢ መስፈርቶች

አከባቢዎች የሚከተሉትን መስፈርቶች ማሟላት አለባቸው:

1) የተመጣጠነ መሆን, ማለትም በቀላሉ ሊፈጩ በሚችል መልክ ሁሉንም የምግብ እና የኃይል ፍላጎቶችን ለማሟላት አስፈላጊ የሆኑትን ንጥረ ነገሮች ይይዛሉ. የመከታተያ ንጥረ ነገሮችን ጨምሮ የኦርጋጅኖች እና የማዕድን (ኢንኦርጋኒክ ያልሆኑ) ንጥረ ነገሮች ምንጮች ናቸው. የማዕድን ቁሶች ወደ ሴል መዋቅር ውስጥ ገብተው ኢንዛይሞችን ብቻ ሳይሆን የመገናኛ ብዙሃን (osmotic pressure, pH, ወዘተ) የፊዚዮኬሚካላዊ ባህሪያትን ይወስናሉ. በርካታ ረቂቅ ተሕዋስያንን ሲያዳብሩ የእድገት ምክንያቶች ወደ መገናኛ ብዙሃን ይጨመራሉ - ቫይታሚኖች, ሴል ሊዋሃድ የማይችል አንዳንድ አሚኖ አሲዶች;

ትኩረት! ረቂቅ ተሕዋስያን፣ ልክ እንደ ሁሉም ህይወት ያላቸው ነገሮች፣ ብዙ ውሃ ያስፈልጋቸዋል።

2) የሃይድሮጂን አየኖች ለተመቻቸ ትኩረት አላቸው - ፒኤች, ብቻ አካባቢ አንድ ለተመቻቸ ምላሽ ጋር, ሼል permeability ላይ ተጽዕኖ, ረቂቅ ተሕዋስያን ንጥረ ሊወስድ ይችላል ጀምሮ.

ለአብዛኞቹ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን, ትንሽ የአልካላይን አካባቢ (pH 7.2-7.4) በጣም ጥሩ ነው. የማይካተቱት Vibrio cholerae - በጣም ጥሩው በአልካላይን ዞን (ፒኤች 8.5-9.0) እና የሳንባ ነቀርሳ በሽታ አምጪ ወኪል ነው ፣ ይህም በትንሹ አሲዳማ ምላሽ (pH 6.2-6.8) ይፈልጋል።

አስፈላጊ ተግባራቸው አሲዳማ ወይም የአልካላይን ምርቶች ረቂቅ ተሕዋስያን በሚያድጉበት ጊዜ ፒኤች እንዳይቀይሩ ለመከላከል ሚዲያዎች መደበቅ አለባቸው ፣ ማለትም ፣ ምርቶቹን የሚያጠፉ ንጥረ ነገሮችን ይይዛሉ ። መለዋወጥ;

3) ለማይክሮባላዊ ሕዋስ isotonic መሆን; ማለትም በአከባቢው ውስጥ ያለው የኦስሞቲክ ግፊት በሴል ውስጥ ካለው ጋር ተመሳሳይ መሆን አለበት. ለአብዛኞቹ ረቂቅ ተሕዋስያን, ጥሩው አካባቢ 0.5% የሶዲየም ክሎራይድ መፍትሄ ነው;

4) የውጭ ተህዋሲያን በጥናት ላይ ባለው ረቂቅ ተሕዋስያን እድገት ውስጥ ጣልቃ ስለሚገቡ የንብረቶቹን መወሰን እና የመካከለኛውን (ቅንብር ፣ ፒኤች ፣ ወዘተ) ባህሪዎችን ስለሚቀይሩ ንፁህ ይሁኑ ።

5) ጠንካራ ሚዲያ እርጥብ እና ረቂቅ ተሕዋስያን የሚሆን ምቹ ወጥነት ያለው መሆን አለበት;

6) የተወሰነ የመድገም አቅም አላቸው፣ ማለትም ኤሌክትሮኖችን የሚለግሱ እና የሚቀበሉ ንጥረ ነገሮች ጥምርታ፣ በ RH 2 ኢንዴክስ የተገለጹ። ይህ አቅም በኦክስጅን የአካባቢን ሙሌት ያሳያል. አንዳንድ ረቂቅ ተሕዋስያን ከፍተኛ አቅም ይጠይቃሉ, ሌሎች ደግሞ ዝቅተኛ ያስፈልጋቸዋል. ለምሳሌ, አናሮብስ በ RH 2 ከ 5 በማይበልጥ ይራባሉ, እና ኤሮቢስ በ RH 2 ከ 10 ያነሰ አይደለም. የአብዛኞቹ አከባቢዎች የመልሶ ማቋቋም አቅም የኤሮቢስ እና የፋኩልቲ anaerobes መስፈርቶችን ያሟላል;

7) በተቻለ መጠን የተዋሃዱ ይሁኑ ፣ ማለትም ቋሚ መጠን ያላቸው የግለሰብ ንጥረ ነገሮችን ይይዛሉ። ስለዚህ, አብዛኞቹ pathogenic ባክቴሪያዎች ለእርሻ የሚሆን ሚዲያ 0.8-1.2 g / l አሚን ናይትሮጅን NH 2, ማለትም, አሚኖ አሲዶች እና ዝቅተኛ polypeptides መካከል አሚኖ ቡድኖች ጠቅላላ ናይትሮጅን መያዝ አለበት; 2.5-3.0 ግ / ሊ ጠቅላላ ናይትሮጅን N; ከሶዲየም ክሎራይድ አንፃር 0.5% ክሎራይድ; 1% pepton.

የመገናኛ ብዙሃን ግልጽነት እንዲኖራቸው የሚፈለግ ነው - የሰብል እድገትን ለመከታተል የበለጠ አመቺ ነው, እና የአካባቢ ብክለትን ከውጭ ተህዋሲያን ጋር ማስተዋል ቀላል ነው.

የመገናኛ ብዙሃን ምደባ

በተለያዩ ረቂቅ ተሕዋስያን ውስጥ የንጥረ ነገሮች እና የአካባቢ ባህሪያት አስፈላጊነት ይለያያሉ. ይህ ሁለንተናዊ አካባቢን የመፍጠር እድልን ያስወግዳል. በተጨማሪም, የአንድ የተወሰነ አካባቢ ምርጫ በጥናቱ ዓላማዎች ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል.

በአሁኑ ጊዜ እጅግ በጣም ብዙ አከባቢዎች * ቀርበዋል, ምደባው በሚከተሉት ባህሪያት ላይ የተመሰረተ ነው.

1. የምንጭ አካላት. በመነሻ አካላት ላይ በመመስረት, ተፈጥሯዊ እና ሰው ሠራሽ ሚዲያዎች ተለይተዋል. የተፈጥሮ ሚዲያ የሚዘጋጀው ከእንስሳት እና ከዕፅዋት መገኛ ምርቶች ነው። እስከ አሁን ድረስ; ከጊዜ በኋላ ጠቃሚ የሆኑ የምግብ ምርቶች (ስጋ, ወዘተ) ከምግብ ባልሆኑ ምርቶች ጋር የሚተኩባቸው ሚዲያዎች ተፈጥረዋል-የአጥንት እና የዓሳ ምግብ, እርሾ መኖ, የደም መርጋት, ወዘተ. የተፈጥሮ ምርቶች በጣም ውስብስብ እና እንደ መኖው ይለያያል, እነዚህ ሚዲያዎች በሰፊው ጥቅም ላይ ይውላሉ. ሰው ሰራሽ ሚዲያ የሚዘጋጀው ከተወሰኑ ኬሚካላዊ ንፁህ ኦርጋኒክ እና ኦርጋኒክ ውህዶች ነው፣ በትክክል በተወሰነ መጠን ተወስዶ በድርብ የተጣራ ውሃ ውስጥ ይሟሟል። የእነዚህ ሚዲያዎች ጠቃሚ ጠቀሜታ የእነሱ ጥንቅር ቋሚ ነው (ምን ያህል እና ምን ንጥረ ነገሮች እንደያዙ ይታወቃል) ስለዚህ እነዚህ ሚዲያዎች በቀላሉ ሊባዙ የሚችሉ ናቸው.

2. ወጥነት(የእፍጋት ደረጃ)። ሚዲያዎች ፈሳሽ, ጥቅጥቅ ያሉ እና ከፊል ፈሳሽ ናቸው. ድፍን እና ከፊል-ፈሳሽ ሚዲያዎች የሚዘጋጁት ከፈሳሽ ሚዲያዎች ሲሆን ይህም የሚፈለገውን ወጥነት ያለው መካከለኛ ለማግኘት ብዙውን ጊዜ agar-agar ወይም gelatin ይጨመራል።

አጋር-አጋር ከተወሰኑ የባህር አረም ዝርያዎች የተገኘ ፖሊሶካካርዴድ ነው. ለጥቃቅን ተሕዋስያን ንጥረ ነገር አይደለም እና አከባቢን ለመጠቅለል ብቻ ያገለግላል. በውሃ ውስጥ, አጋር በ 80-100 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ውስጥ ይቀልጣል እና በ 40-45 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ውስጥ ይጠናከራል.

Gelatin የእንስሳት ፕሮቲን ነው. የጌላቲን ሚዲያ በ25-30 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ይቀልጣል, ስለዚህ ሰብሎች በአብዛኛው በክፍል ሙቀት ውስጥ ይበቅላሉ. የእነዚህ ሚዲያዎች ጥግግት ከ6.0 በታች በሆነ ፒኤች እና ከ7.0 በላይ ይቀንሳል፣ እና እነሱ በደንብ እየጠነከሩ ይሄዳሉ። አንዳንድ ረቂቅ ተሕዋስያን ጄልቲንን እንደ ንጥረ ነገር ይጠቀማሉ - እያደጉ ሲሄዱ መካከለኛ ፈሳሽ.

በተጨማሪም፣ የረጋ ደም ሴረም፣ የተዳፈነ እንቁላል፣ ድንች እና ሚዲያ ከሲሊካ ጄል ጋር እንደ ጠንካራ ሚዲያ ጥቅም ላይ ይውላሉ።

3. ውህድ. አከባቢዎች ወደ ቀላል እና ውስብስብ የተከፋፈሉ ናቸው. የመጀመሪያው የስጋ ፔፕቶን መረቅ (MPB)፣ የስጋ peptone agar (MPA)፣ ሆቲንግ መረቅ እና አጋር፣ የተመጣጠነ የጀልቲን እና የፔፕቶን ውሃ ይገኙበታል። ውስብስብ ሚዲያ የሚዘጋጀው ወደ ቀላል ሚዲያ ደም፣ ሴረም፣ ካርቦሃይድሬትስ እና ለአንድ የተወሰነ ረቂቅ ተሕዋስያን ለመራባት አስፈላጊ የሆኑ ሌሎች ንጥረ ነገሮችን በመጨመር ነው።

4. ዓላማሀ) መሰረታዊ (በተለምዶ ጥቅም ላይ የሚውለው) መገናኛ ብዙሃን በሽታ አምጪ ተህዋሲያንን ለማልማት ያገለግላሉ። እነዚህ ከላይ የተገለጹት MPA, MPB, Hottinger's broth እና agar, peptone ውሃ;

ለ) ልዩ ሚዲያዎች በቀላል ሚዲያ ላይ የማይበቅሉ ረቂቅ ተሕዋስያንን ለመለየት እና ለማደግ ያገለግላሉ። ለምሳሌ, ለ streptococcus እርባታ, ስኳር ወደ መገናኛ ብዙሃን ይጨመራል, ለ pneumo- እና meningococci - የደም ሴረም, ለ ደረቅ ሳል መንስኤ ወኪል - ደም;

ሐ) የተመረጡ (የተመረጡ) አካባቢዎች የተወሰኑ ተህዋሲያንን ለማግለል ያገለግላሉ ፣ የእነሱን እድገት የሚደግፉ ፣ ተህዋሲያን ተሕዋስያን እድገትን በማዘግየት ወይም በማፈን። ስለዚህ, ይዛወርና ጨው, E. ኮላይ እድገት ለማፈን, ታይፎይድ ትኩሳት ከፔል ወኪል የሚሆን አካባቢ ምርጫ ያደርጋል. አንዳንድ አንቲባዮቲኮች፣ ጨዎች ሲጨመሩ እና ፒኤች ሲቀየሩ ሚዲያዎች የሚመረጡ ይሆናሉ።

ፈሳሽ የሚመረጡ ሚዲያዎች ክምችት ሚዲያ ይባላሉ። የእንደዚህ አይነት መካከለኛ ምሳሌ የፔፕቶን ውሃ ከ 8.0 ፒኤች ጋር ነው. በዚህ ፒኤች ላይ Vibrio cholerae በላዩ ላይ በንቃት ይባዛል, እና ሌሎች ረቂቅ ተሕዋስያን አያድጉም;

መ) ልዩነት መመርመሪያ ሚዲያ አንድን ማይክሮቦች ከሌላው በኢንዛይም እንቅስቃሴ ለመለየት (ለመለየት) ያስችለዋል፣ ለምሳሌ ሂስ ሚዲያ በካርቦሃይድሬትስ እና አመላካች። ካርቦሃይድሬትን የሚያበላሹ ረቂቅ ተሕዋስያን በማደግ የመካከለኛው ቀለም ይለወጣል;

ሠ) ተጠባቂ ሚዲያዎች ለሙከራ ቁሳቁስ የመጀመሪያ ደረጃ ዘር እና ማጓጓዝ የታቀዱ ናቸው; በሽታ አምጪ ተህዋሲያን መሞትን ይከላከላሉ እና የ saprophytes እድገትን ያቆማሉ። የዚህ ዓይነቱ መካከለኛ ምሳሌ የተለያዩ የአንጀት ባክቴሪያዎችን ለመለየት በተደረጉ ጥናቶች ውስጥ ሰገራ ለመሰብሰብ የሚያገለግል የጊሊሰሮል ድብልቅ ነው።

አንዳንድ ሚዲያዎችን ለማዘጋጀት የምግብ አዘገጃጀት መመሪያዎች በሚቀጥለው ክፍል መጨረሻ እና በሁለተኛው የመማሪያ ክፍል ውስጥ ተሰጥተዋል.

ጥያቄዎችን ይቆጣጠሩ

1. የንጥረ ነገር መገናኛ ብዙሃን ምን መስፈርቶች ማሟላት አለባቸው?

2. ሚዲያ እንደ መጀመሪያ ክፍሎቻቸው እንዴት ይከፋፈላሉ?

3. ለታመቀ ሚዲያ የሚያገለግሉት ንጥረ ነገሮች ምንድን ናቸው?

4. የትኞቹ ሚዲያዎች ቀላል ወይም በብዛት ጥቅም ላይ ይውላሉ እና ለምን ጥቅም ላይ ይውላሉ?

5. ውስብስብ ተብለው የሚጠሩት የትኞቹ አካባቢዎች ናቸው, ምን እንደ መሠረት ሆኖ ያገለግላል?

6. ሌሎችን በመጨፍለቅ የአንዳንድ ማይክሮቦች ተመራጭ እድገትን የሚፈቅዱት የትኞቹ አካባቢዎች ናቸው?

7. ማይክሮቦች የኢንዛይም እንቅስቃሴ በየትኛው ሚዲያ ላይ ጥናት ተደርጓል?

የአካል ብቃት እንቅስቃሴ ያድርጉ

ቅጹን ይሙሉ, አከባቢዎች በየትኞቹ ቡድኖች እንደተከፋፈሉ ያመለክታል.

የመገናኛ ብዙሃን ዝግጅት

ሚዲያን ለማዘጋጀት የሚዘጋጁት ምግቦች እንደ መስታወት አይነት የሚለቀቁት አልካላይስ ወይም የብረት ኦክሳይድ የመሳሰሉ ባዕድ ነገሮች መያዝ የለባቸውም። የመስታወት, የኢሜል ወይም የአሉሚኒየም ማብሰያዎችን መጠቀም ጥሩ ነው. ከፍተኛ መጠን ያለው መካከለኛ (በአስር እና በመቶዎች የሚቆጠሩ ሊትር) በልዩ ዲጂተሮች ወይም ሬአክተሮች (ምስል 14) ውስጥ ይዘጋጃሉ. ከመጠቀምዎ በፊት ምግቦቹ በደንብ መታጠብ, መታጠብ እና መድረቅ አለባቸው. አዲስ የብርጭቆ እቃዎች ለ 30 ደቂቃዎች በቅድሚያ በ 1-2% የሃይድሮክሎሪክ አሲድ መፍትሄ ወይም በዚህ መፍትሄ ውስጥ በአንድ ምሽት ይጠመቃሉ, ከዚያም ለአንድ ሰአት በሚፈስ ውሃ ውስጥ ይታጠባሉ.

ትኩረት! ለመገናኛ ብዙሃን ዝግጅት የታቀዱ ምግቦች ለሌላ ዓላማዎች ጥቅም ላይ መዋል የለባቸውም, ለምሳሌ ኬሚካላዊ ሪጀንቶችን ወይም ፀረ-ተባይ መፍትሄዎችን ለማከማቸት - የእነዚህ ንጥረ ነገሮች ዱካዎች እንኳን ረቂቅ ተሕዋስያንን እድገት ላይ ጣልቃ ሊገቡ ይችላሉ.

የምግብ ክምችትለአብዛኛዎቹ ሚዲያዎች ዝግጅት የእንስሳት ወይም የእፅዋት አመጣጥ ምርቶች ጥቅም ላይ ይውላሉ-ስጋ እና ምትክ ፣ ወተት ፣ እንቁላል ፣ ድንች ፣ አኩሪ አተር ፣ በቆሎ ፣ እርሾ ፣ ወዘተ.

መሰረታዊ የንጥረ-ምግብ ሾርባዎች የሚዘጋጁት በስጋ ውሃ ወይም በመነሻ ቁሳቁስ በአሲድ ወይም በኢንዛይም ሃይድሮሊሲስ አማካኝነት የተገኙ የተለያዩ ምግቦችን በመጠቀም ነው። ከስጋ ውሀ ከተዘጋጁት ሾርባዎች ከ 5-10 እጥፍ የሚበልጥ ቆጣቢነት ከምግብ መፍጨት የሚዘጋጁ ሾርባዎች። የተፈጩ ሚዲያዎች በአሚኖ አሲዶች የበለፀጉ ናቸው ስለዚህም የበለጠ ገንቢ ናቸው; የበለጠ የማቋት አቅም አላቸው፣ ማለትም የበለጠ የተረጋጋ የፒኤች እሴት አላቸው። በተጨማሪም የምግብ መፈጨትን ከስጋ ምትክ (የደም መርጋት, የእንግዴ, የ casein, ወዘተ) ማዘጋጀት ይቻላል.

በአሁኑ ጊዜ የላቦራቶሪዎች የስጋ ውሃ እና የምግብ መፍጫ አካላት አቅርቦት ማእከላዊ ነው. ብዙውን ጊዜ የሆቲንገርን የጣፊያ መፍጨት፣ casein hydrolysates ወይም የመመገቢያ እርሾን ይጠቀማሉ። አስፈላጊዎቹ ሚዲያዎች በተወሰኑ የምግብ አዘገጃጀቶች መሰረት ከእነዚህ በከፊል የተጠናቀቁ ምርቶች ይዘጋጃሉ.

የማብሰያ ደረጃዎችመካከለኛ: 1) ምግብ ማብሰል; 2) ጥሩውን የፒኤች እሴት ማቋቋም; 3) መብረቅ; 4) ማጣሪያ; 5) መፍሰስ; 6) ማምከን; 7) ቁጥጥር;

የተቀቀለበተከፈተ እሳት ፣ በውሃ መታጠቢያ ፣ በአውቶክላቭ ወይም በእንፋሎት የሚሞቁ የምግብ መፍጫ አካላት አካባቢ።

ፒኤች በማቀናበር ላይሚዲያ የሚመረተው አመላካች ወረቀቶችን በመጠቀም ነው። ፒኤች በትክክል ለመወሰን ፖታቲሞሜትር ይጠቀሙ, በመመሪያው መሰረት የመስታወት ኤሌክትሮዶችን ወይም ኮምፓሬተር (ሚካኤሊስ አፓርተር) በመጠቀም, ለሙከራ ቱቦዎች ጎጆዎች (ምስል 15) እና ለተወሰነ ፒኤች መመዘኛዎች ስብስብ ያካትታል. ሚዲያን በሚዘጋጅበት ጊዜ ብዙውን ጊዜ ጠቋሚውን ሜታኒትሮፊኖል ይጠቀማሉ, ይህም በ 6.8-8.4 ክልል ውስጥ ቀለሙን ይለውጣል.

የመካከለኛውን ፒኤች ለመወሰን 4 የሙከራ ቱቦዎች, የመስታወት ዲያሜትር እና ቀለም ከመመዘኛዎቹ የሙከራ ቱቦዎች አይለያዩም, በ 1, 2, 3 እና 5 ክፍተቶች ውስጥ ይቀመጣሉ (ምስል 15 ይመልከቱ). 5 ሚሊ ሜትር የተጣራ ውሃ በ 1 ኛ እና 3 ኛ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ይፈስሳል; በ 5 ኛ - 7 ml; በ 2 ኛ - 4 ሚሊ ሜትር ውሃ እና 1 ሚሊር አመላካች. የሚፈለገው ፒኤች መመዘኛዎች በ 4 እና 6 ውስጥ ተቀምጠዋል። 2 ሚሊ ሜትር የቀዘቀዘ መካከለኛ ወደ 1 ኛ, 2 ኛ እና 3 ኛ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ይፈስሳል. የሙከራ ቱቦዎች ይዘት የተደባለቁ ናቸው.

በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ያሉት የፈሳሾች ቀለም የመሳሪያውን የኋላ ቀዳዳ በማጣሪያ (ፈሳሾቹ ኃይለኛ ቢጫ ከሆኑ ማት ወይም ሰማያዊ) በመሸፈን በሚተላለፈው ብርሃን ይነጻጸራል። የሙከራው መፍትሄ ፒኤች ከመደበኛው ፒኤች ጋር ይዛመዳል, ቀለሙ ከቀለም ጋር ይዛመዳል.

ሚዲያን በተሰጠ ፒኤች ሲዘጋጅ ደረጃዎች በ 4 እና 6 ክፍተቶች ውስጥ ይቀመጣሉ ፣ ፒኤች ከሚፈለገው ጋር ቅርብ ነው ፣ እና የተወሰነ መጠን ያለው የአልካላይን መፍትሄ ከቡሬት ወደ 2 ኛ የሙከራ ቱቦ በሙከራ መካከለኛ እና አመልካች, በ 2 ኛ የሙከራ ቱቦ ውስጥ ያለው ፈሳሽ ከመመዘኛዎቹ ቀላል ከሆነ, ወይም የአሲድ መፍትሄ - መስፈርቶቹ ቀላል ከሆኑ. በ 2 ኛ የሙከራ ቱቦ ውስጥ ያለው ፈሳሽ ቀለም ከመመዘኛዎቹ ቀለም ጋር እስኪመሳሰል ድረስ አልካሊ (ወይም አሲድ) ተጨምሯል. በ 2 ኛው የሙከራ ቱቦ ውስጥ ወደ 2 ሚሊ ሜትር መካከለኛ የተጨመረው የአልካላይን (ወይም አሲድ) መጠን ለጠቅላላው የተዘጋጀው መካከለኛ መጠን እንደገና ይሰላል. ለምሳሌ, የተፈለገውን ፒኤች ለማግኘት, 2 ጠብታዎች (0.1 ml) 0.05 N ወደ 2 ሚሊ ሜትር መካከለኛ ተጨምረዋል. የአልካላይን መፍትሄ, ከዚያም 1 ሊትር ወደ አልካላይዝ ማድረግ 500 እጥፍ ተጨማሪ ያስፈልግዎታል, ማለትም 50 ml የ 0.05 N. ወይም 2.5 ml 1 N. የአልካላይን መፍትሄ.

በማምከን ጊዜ የመገናኛ ብዙሃን ፒኤች በ 0.2 ይቀንሳል, ስለዚህ, ከ 7.2-7.4 ፒኤች ጋር መካከለኛ ለማግኘት በመጀመሪያ ከ 7.4-7.6 ፒኤች ጋር ይዘጋጃል.

መብረቅሚዲያ የሚመረተው ምግብ በሚዘጋጅበት ጊዜ ደመናማ ወይም ጨለማ ከሆነ ነው። ለማብራራት የዶሮ እንቁላል ነጭውን ወደ 50 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ በሚሞቅ መካከለኛ መጠን ባለው ድብል የተደበደበ የዶሮ እንቁላል ውስጥ አፍስሱ, ቅልቅል እና ቀቅለው. ፕሮቲን እየረጋ ሲሄድ በመሃሉ ውስጥ የተንጠለጠሉ ንጥረ ነገሮችን ወደ ደለል ይሸከማል። በተመሳሳይ ሁኔታ ከእንቁላል ነጭ (ከ 20-30 ሚሊ ሊትር በ 1 ሊትር መካከለኛ) ምትክ የደም ሴረም መጠቀም ይችላሉ.

ማጣራትፈሳሽ እና የቀለጠ የጂልቲን ሚዲያ የሚመረተው በእርጥብ ወረቀት ወይም በጨርቅ ማጣሪያ ነው። የአጋር ሚዲያን ማጣራት አስቸጋሪ ነው - በፍጥነት ይጠነክራሉ. ብዙውን ጊዜ የሚጣሩት በጥጥ-ፋሻ ማጣሪያ (የጋዝ ናፕኪን በፋሻ ውስጥ ይቀመጣል እና የጥጥ ሱፍ በላዩ ላይ ይቀመጣል)። በሞቃት አውቶክላቭ ወይም በጋለ ምድጃ ውስጥ ካጣራህ የወረቀት ወይም የጨርቅ ማጣሪያዎችን መጠቀም ትችላለህ።

የአጋር ሚዲያን ማጣራት በማስተካከል ሊተካ ይችላል. መካከለኛው ወደ ረዥም ሲሊንደሪክ ዕቃ ውስጥ ፈሰሰ እና በአውቶክላቭ ውስጥ ይቀልጣል. በጠፋው መሳሪያ ውስጥ መካከለኛው ቀስ ብሎ ሲቀዘቅዝ በውስጡ የተንጠለጠሉት ቅንጣቶች ወደ ታች ይቀመጣሉ. በሚቀጥለው ቀን የአጋር ክሎቱ ከመርከቧ ውስጥ ይወገዳል (ይህን ለማድረግ, እቃው በአጭር ጊዜ ውስጥ በሙቅ ውሃ ውስጥ ይቀመጣል) እና የተከማቸ ዝቃጭ ያለው የታችኛው ክፍል በቢላ ተቆርጧል. የላይኛው ክፍል ይቀልጣል እና በተገቢው መያዣዎች ውስጥ ይፈስሳል.

ፈሰሰበሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ያሉ ሚዲያዎች (እያንዳንዱ 3-5 ሚሊር ወይም 10 ሚሊ ሊትር) ፣ ብልቃጦች ፣ ብልቃጦች ፣ ፍራሾች እና ጠርሙሶች አቅም ከ 2/3 አይበልጥም ፣ ምክንያቱም በማምከን ጊዜ መቆለፊያዎቹ እርጥብ ሊሆኑ እና ሚዲያዎች የመውለድ ችሎታቸውን ያጣሉ ።

ከ 100 ዲግሪ ሴንቲግሬድ በላይ በሆነ የሙቀት መጠን የተበከሉ ሚዲያዎች ንጹህና ደረቅ መያዣዎች ውስጥ ይፈስሳሉ. በዝቅተኛ የሙቀት መጠን ውስጥ ማምከን የቻሉ ሚዲያዎች ወደ ንጹህ እቃዎች ውስጥ መፍሰስ አለባቸው.

ሚዲያው ፈንገስ በመጠቀም ይፈስሳል፣በዚህም ጫፍ ላይ የሞህር መቆንጠጫ ያለው የጎማ ቱቦ ነው። ለመለካት ማከፋፈያ, ቤከር, ቡሬቴስ, ማከፋፈያዎች, መርፌዎች, ፓይፕቶች, ወዘተ ጥቅም ላይ ይውላሉ (ምስል 16).

ከመካከለኛው ጋር ያሉት መያዣዎች ብዙውን ጊዜ በጥጥ-ጋዝ ማቆሚያዎች ይዘጋሉ, በየትኛው የወረቀት መያዣዎች ላይ ይቀመጣሉ. በሚፈስስበት ጊዜ መካከለኛው የምድጃዎቹን ጠርዞች አያጠጣም, አለበለዚያ ማቆሚያዎች በእነሱ ላይ ሊጣበቁ ይችላሉ. የመካከለኛው ስም እና የዝግጅቱ ቀን ያለው መለያ ከእያንዳንዱ ዕቃ ጋር መያያዝ አለበት.

ማምከን. የማምከን ሁነታ በመካከለኛው ስብጥር ላይ የተመሰረተ እና በምግብ አዘገጃጀት ውስጥ ይገለጻል. የሚዲያ የማምከን አገዛዝ ግምታዊ ንድፍ በሰንጠረዥ ውስጥ ተሰጥቷል። 8.

1 (ካርቦሃይድሬትስ፣ ፕሮቲኖች ወይም ቪታሚኖች የያዙ ፈሳሽ ሚዲያዎች የባክቴሪያ ማጣሪያዎችን በመጠቀም በደንብ ማምከን አለባቸው።)

ቁጥጥርየተዘጋጀ ሚዲያ: ሀ) የመገናኛ ብዙሃን sterility ለመቆጣጠር ለ 2 ቀናት በሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ያስቀምጡት, ከዚያ በኋላ ይመረመራል. በመገናኛ ብዙሃን ላይ ምንም የእድገት ምልክቶች ካልታዩ, እንደ ጸዳ ይቆጠራሉ እና የእያንዳንዱ ተከታታይ ናሙናዎች ለኬሚካል ቁጥጥር ይቀርባሉ; ለ) የኬሚካል ቁጥጥር: ፒኤች, አጠቃላይ ይዘት እና አሚን ናይትሮጅን, peptone, ክሎራይድ በመጨረሻ ተመስርቷል (ብዛታቸው በምግብ አዘገጃጀት ውስጥ ከተጠቀሰው ጋር መዛመድ አለበት).

የመገናኛ ብዙሃን የኬሚካል ቁጥጥር በኬሚካል ላቦራቶሪ ውስጥ ይካሄዳል; ሐ) ለባዮሎጂካል ቁጥጥር ፣ ብዙ የመካከለኛው ናሙናዎች በልዩ ሁኔታ በተመረጡ ረቂቅ ተሕዋስያን ባህሎች የተከተቡ ናቸው ፣ እና እድገታቸው የመካከለኛውን የአመጋገብ (የእድገት) ባህሪዎችን ለመገምገም ያገለግላሉ። የተጠናቀቀው መካከለኛ ስም እና የአቅርቦት, የቁጥጥር ውጤቶች, ወዘተ የሚያመለክት መለያ እና ፓስፖርት.

ሚዲያውን በክፍል ሙቀት ውስጥ በካቢኔ ውስጥ ያከማቹ ፣ በተለይም ለእነሱ ተብሎ የተነደፈ። እንደ ደም እና ቫይታሚን ሚዲያ ያሉ አንዳንድ ሚዲያዎች በማቀዝቀዣ ውስጥ ይቀመጣሉ።

ቀላል (መሰረታዊ) ሚዲያ እና isotonic ሶዲየም ክሎራይድ መፍትሄ ለማዘጋጀት የምግብ አዘገጃጀት መመሪያዎች

ኢስቶኒክ ሶዲየም ክሎራይድ መፍትሄ. በ 1 ሊትር ፈሳሽ ውሃ ውስጥ 9 ግራም ሶዲየም ክሎራይድ ይጨምሩ. መፍትሄው ተጣርቷል, የሚፈለገው ፒኤች ተስተካክሏል እና አስፈላጊ ከሆነ በ 120 ° ሴ ለ 30 ደቂቃዎች ማምከን.

ስጋ pepton መረቅ (MPB). 1% peptone እና 0.5% x በስጋ ውሃ ውስጥ ይጨምራሉ. የሶዲየም ክሎራይድ ክፍሎችን በትንሽ እሳት ላይ ለ 10-15 ደቂቃዎች በማፍላት ቁሳቁሶቹን እንዲቀልጡ ያድርጉ ፣ የተፈለገውን ፒኤች ያዘጋጁ እና ዝናብ እስኪፈጠር ድረስ ለ 30-40 ደቂቃዎች እንደገና ያፈሱ። አጣራ, ውሃ ወደ መጀመሪያው ድምጽ ጨምር እና ለ 20 ደቂቃዎች በ 120 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ማምከን.

የሆቲንተር ሾርባ. የ Hottinger መፍጨት ምን ያህል አሚን ናይትሮጅን እንደያዘ እና ምን ያህል በሾርባ ውስጥ መሆን እንዳለበት ላይ በመመርኮዝ 5-6 ጊዜ በውሃ ይረጫል። ለምሳሌ, ከ 1.2 ግ / ሊ አሚን ናይትሮጅን ጋር አንድ መካከለኛ ለማዘጋጀት, 9.0 የያዘ የምግብ መፍጨት. g/l፣ ከ7-5 ጊዜ መሟሟት አለበት (9.0፡1.2)። 0.5% ሶዲየም ክሎራይድ በተቀባው የምግብ መፈጨት ውስጥ ይጨምሩ እና ጨው እስኪቀልጥ ድረስ በትንሽ እሳት ላይ ቀቅለው በቀዝቃዛው መካከለኛ ፒኤች ያስተካክሉ ፣ ያጣሩ ፣ ያፈስሱ እና ለ 20 ደቂቃዎች ያፍሱ ።

ስጋ pepton agar (MPA). በተጠናቀቀው መረቅ ውስጥ 2-3% የተፈጨ agar-agar ይጨምሩ እና (ከማምከን በፊት ወይም በኋላ) እና ቀቅለው በትንሽ እሳት ላይ አጃው ሙሉ በሙሉ እስኪቀልጥ ድረስ ያብስሉት። MPA በአውቶክላቭ ወይም በ Koch apparate ውስጥ መቀቀል ይቻላል. የተዘጋጀው መካከለኛ, አስፈላጊ ከሆነ, ይብራራል, ተጣርቶ እና ለ 20 ደቂቃዎች በ 120 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ይጸዳል.

ከፊል-ጠንካራ agar 0.4-0.5% agar-agar ይዟል.

የተመጣጠነ ጄልቲን. 10-15% gelatin የተጠናቀቀ መረቅ ታክሏል, ይቀልጣሉ ድረስ የጦፈ (አትቀቅል!), የጸዳ ዕቃ ውስጥ ፈሰሰ እና የሚፈሰው በእንፋሎት sterilized.

ውስብስብ ሚዲያን ለማዘጋጀት የምግብ አዘገጃጀት መመሪያዎች

ሚዲያ ከካርቦሃይድሬት ጋር. የሚፈለገው መጠን (0.1-2%) የአንድ የተወሰነ ካርቦሃይድሬት (ለምሳሌ ግሉኮስ) ወደ ዋናው መረቅ ወይም የቀለጠ agar ይጨመራል። ከተሟሟት በኋላ ወደ ንፁህ ማጠራቀሚያዎች ውስጥ አፍስሱ እና በሚፈስሰው እንፋሎት ያፅዱ። ካርቦሃይድሬትስ በከፊል በዚህ የማምከን አገዛዝ እንኳን ተደምስሷል, በባክቴሪያ ማጣሪያ አማካኝነት የካርቦሃይድሬት 25-30% መፍትሄ መጨመር ይመረጣል, በሚፈለገው መጠን ከኤሴፕሲስ ጋር ወደ ንፁህ መሰረታዊ ሚዲያዎች - ፅንስን ከተመለከተ በኋላ መካከለኛ ነው. ለመጠቀም ዝግጁ.

ሚዲያ ከደም ጋርከ 1 እስከ 30% (በተለምዶ 5%) የጸዳ ደፊብሪንየል ደም በአሴፕቲክ ሁኔታዎች (በተለይም በሳጥን ውስጥ) በመጨመር ከንፁህ ቀላል ሚዲያ የተዘጋጀ። ከዚህ በፊት የአጋር ሚዲያ ይቀልጣል እና ወደ 45 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ይቀዘቅዛል መካከለኛ ሙቀት መርከቧን በታችኛው መንገጭላ አንግል ላይ ወደ አንገት በማምጣት ይወሰናል. በትክክለኛው የሙቀት መጠን ሊቋቋሙት የሚችል የሙቀት ስሜት መኖር አለበት, ነገር ግን አይቃጠሉም. ደም ከተጨመረ በኋላ መካከለኛው እስኪጠናከር ድረስ, የመርከቧ ይዘት በደንብ ይደባለቃል እና ወደ ኩባያዎች ወይም የሙከራ ቱቦዎች ይፈስሳል.

ትኩረት! ደም ያለው ሚዲያ መቅለጥ አይችልም - ደሙ ባህሪያቱን ይለውጣል.

ሚዲያ ከደም ሴረም ጋርእንደ ደም ሚዲያ በተመሳሳይ መንገድ ተዘጋጅቷል. ወደ መሰረታዊ ሚዲያው ከ10-20% የሚሆነውን ሴረም ጨምረዉ መከላከያ የሌለው እና ቀደም ሲል በ 56 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ለ 30 ደቂቃዎች በውኃ መታጠቢያ ውስጥ ወይም በአክቲቬተር ውስጥ እንዲነቃ ይደረጋል. በማይነቃነቅ ጊዜ, በማይክሮቦች ላይ ጎጂ ውጤት ያለው ንጥረ ነገር (ማሟያ) ይደመሰሳል.

ሚዲያ ከቢል ጋር. ይዛወርና መካከለኛ መጠን 10-40% የሆነ መጠን ውስጥ ቀላል ሚዲያ ታክሏል, የተፈለገውን ፒኤች ተዘጋጅቷል እና 120 ° ሴ ላይ 20 ደቂቃ sterilized. Aseptic ሁኔታዎች ሥር sterile ይዛወርና መካከለኛ ሊጨመር ይችላል.

የአጋር ሚዲያን ወደ ፔትሪ ምግቦች ማፍሰስ. ከመፍሰሱ በፊት ሚዲያዎች በውኃ መታጠቢያ ውስጥ ይቀልጣሉ እና ወደ 45-50 ° ሴ ይቀዘቅዛሉ. ንብርብሩ ከፍ ያለ ከሆነ, ቅኝ ግዛቶች በእሱ ላይ ያነሰ ንፅፅር ይመስላሉ. በጣም ቀጭን በሆነ ንብርብር, የምግብ ንጥረ ነገሮች እና የእርጥበት መጠን በከፍተኛ ሁኔታ የተገደበ ነው (መካከለኛው በፍጥነት ይደርቃል) - የእርሻ ሁኔታዎች ይበላሻሉ.

በአሴፕቲክ ሁኔታዎች ውስጥ ሚዲያዎችን ወደ ንጹህ ኩባያዎች ያፈስሱ። ኩባያዎቹ በክዳኑ ላይ ተቀምጠዋል. መካከለኛው ያለው እቃ በእሳቱ አጠገብ በመያዝ በቀኝ እጅ ይወሰዳል. በግራ እጅዎ, ቡሽውን ያስወግዱ, በትንሽ ጣትዎ እና መዳፍዎ ይያዙት. የመርከቧ አንገት ይቃጠላል እና ክዳኑ በግራ እጁ በሁለት ጣቶች በትንሹ ይከፈታል. የጠርሙሱን ጫፍ ሳይነካው የጠርሙሱን አንገት ከሱ በታች ያድርጉት. መካከለኛውን በሚፈስስበት ጊዜ, ከጽዋው ግርጌ ላይ እኩል መሰራጨቱን ያረጋግጡ. በሚፈስበት ጊዜ የአየር አረፋዎች በመገናኛው ላይ ከተፈጠሩ ፣ መካከለኛው ከመደነቁ በፊት ክብሪት ወይም የእሳት ነበልባል ይተግብሩ - አረፋዎቹ ይፈነዳሉ። ከዚያም ጽዋው ይዘጋል እና መካከለኛው እንዲጠናከር ይፈቀድለታል. በፈሰሰው ቀን መዝራት ከተሰራ, መካከለኛው መድረቅ አለበት. ይህንን ለማድረግ በቴርሞስታት ውስጥ ያሉትን ኩባያዎች በጥንቃቄ ይክፈቱ እና ለ 20-30 ደቂቃዎች ክፍት በሆነው ጎን ክዳኖችን እና ኩባያዎችን ይጫኑ. መዝራት ከተፈሰሰ በኋላ ባለው ማግስት ከሆነ, ኩባያዎቹ ሳይደርቁ, በተመሳሳይ ወረቀት ውስጥ ተጣብቀው በማቀዝቀዣ ውስጥ ይቀመጣሉ.

የ agar slants ዝግጅት. የሙከራ ቱቦዎች 4-5 ሚሊ sterile ቀልጦ agar መካከለኛ አንድ ዝንባሌ ቦታ ላይ (በግምት 20 ° አንግል ላይ) ወደ መካከለኛ የሙከራ ቱቦ 2/3 በላይ እንዳይራዘም, አለበለዚያ ማቆሚያውን እርጥብ ይሆናል. መካከለኛው ከተጠናከረ በኋላ የሙከራ ቱቦዎች በአቀባዊ ይቀመጣሉ እና ኮንደንስቱ እንዲፈስ ይደረጋል. አዲስ የተቆረጠ አጋር መጠቀም የተሻለ ነው.

ትኩረት! ኮንደንስ በሌለበት አካባቢ መጠቀም አይችሉም። በውሃ መታጠቢያ ውስጥ እንደገና ማቅለጥ እና ማጨድ አለበት.

ደረቅ አካባቢዎች

የአገር ውስጥ ኢንዱስትሪ ደረቅ ሚዲያዎችን ለተለያዩ ዓላማዎች ያመርታል-ቀላል ፣ የተመረጠ ፣ ልዩነት ምርመራ ፣ ልዩ። እነዚህ በጠርሙሶች ውስጥ ያሉ ዱቄቶች በሾላ ካፕ። ደረቅ ሚዲያን በጨለማ ቦታ ውስጥ ያከማቹ, በጥብቅ የተዘጉ - hygroscopic ናቸው. በቤተ ሙከራ ውስጥ, ሚዲያዎች በመለያው ላይ በተሰጠው መመሪያ መሰረት ከዱቄቶች ይዘጋጃሉ.

የደረቅ ሚዲያ በላብራቶሪ ውስጥ ከሚዘጋጁት ሚዲያዎች ጋር ሲነፃፀር ያለው ጠቀሜታ መደበኛ ባህሪያቸው (በብዛት ይመረታሉ)፣ የዝግጅቱ ቀላልነት፣ በማንኛውም (ተጓዥም ቢሆን) ሁኔታዎች ውስጥ እንዲገኙ ማድረግ፣ መረጋጋት እና ወጪ ቆጣቢነት ናቸው። ከስጋ ተተኪዎች መዘጋጀት መቻላቸው አስፈላጊ ነው-hydrolyzed casein, fibrin, sprat እና ሌላው ቀርቶ ማይክሮባይት ሴሎች (ሳርሲን) የፕሮቲን ክፍልፋዮች.

ጥያቄዎችን ይቆጣጠሩ

1. አብዛኛዎቹ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ማይክሮቦችን ለማልማት የሚዲያ ፒኤች ከማምከን በፊት ምን መሆን አለበት እና ለምን?

2. የአጋር ሚዲያ በምን የሙቀት መጠን ይቀልጣል እና ያጠናክራል?

3. ካርቦሃይድሬትስ እና ፕሮቲን ያላቸው ሚዲያዎች የሚፈስሱባቸው ምግቦች እንዴት መዘጋጀት አለባቸው?

የአካል ብቃት እንቅስቃሴ ያድርጉ

1. MPB, MPA, broth እና Hottinger agar በ pH 7.2-7.4 ያዘጋጁ, ወደ ጠርሙሶች እና የሙከራ ቱቦዎች ያፈስሱ; ማምከን.

2. የሂስ መካከለኛውን ከደረቁ ዱቄቶች ያዘጋጁ ፣ 4-5 ሚሊ ሜትር ወደ የሙከራ ቱቦዎች ያፈሱ እና ያጸዳሉ።

3. የደም አጋርን ያዘጋጁ እና ወደ ፔትሪ ምግቦች ያፈስሱ.

4. Endo, EMS, Ploskirev ሚዲያን ከደረቁ ብናኞች ያዘጋጁ እና ወደ ፔትሪ ምግቦች ያፈስሱ.

5. agar slant ያዘጋጁ.

የመዝራት ዘዴዎች

የባክቴሪያ ምርምር አስፈላጊ ደረጃ ባህል ነው. በጥናቱ ዓላማ ላይ በመመርኮዝ የኢንኩሉም ተፈጥሮ እና አካባቢው የተለያዩ የክትባት ዘዴዎች ጥቅም ላይ ይውላሉ. ሁሉም የግዴታ ግብን ያካትታሉ: ሰብሉን ከውጭ ማይክሮቦች ለመከላከል. ስለዚህ, በፍጥነት መስራት አለብዎት, ነገር ግን የአየር ንዝረትን የሚጨምሩ ድንገተኛ እንቅስቃሴዎች ሳይኖሩ. እየዘሩ ማውራት አይችሉም። በሳጥን ውስጥ መዝራትን ማድረግ የተሻለ ነው.

ትኩረት! ከተላላፊ ነገሮች ጋር በሚሰሩበት ጊዜ የግል የደህንነት ጥንቃቄዎችን መከተልዎን ያስታውሱ።

ከሙከራ ቱቦ እስከ የሙከራ ቱቦ ድረስ ባህል. የመሞከሪያው ቱቦ ኢንኩሉም ያለው እና መካከለኛው ያለው የሙከራ ቱቦ በግራ እጁ በትንሹ ዘንበል ብሎ በአውራ ጣት እና በግንባር ጣት መካከል ስለሚደረግ የሙከራ ቱቦዎች ጠርዞቹ በተመሳሳይ ደረጃ ላይ ሲሆኑ መሰረታቸው በእጁ ላይ ነው። ብዙውን ጊዜ ከክትባቱ ጋር ያለው የሙከራ ቱቦ ከእርስዎ ጋር እንዲቀራረብ ይደረጋል. የባክቴሪያ ሉፕ በቀኝ እጁ እንደ እስክሪብቶ ተይዟል እና በማቃጠያ ነበልባል ውስጥ በአቀባዊ በመያዝ ማምከን። ትንሹን ጣት እና የቀኝ እጁን የዘንባባ ጠርዝ በመጠቀም ሁለቱንም መሰኪያዎች በተመሳሳይ ጊዜ ያስወግዱ። መሰኪያዎቹ የሚወገዱት በጄርክ አይደለም, ነገር ግን በተቀላጠፈ - በብርሃን ሽክርክሪት እንቅስቃሴዎች. ማቆሚያዎቹን ካስወገዱ በኋላ, የሙከራ ቱቦዎች ጠርዞች በማቃጠያው ነበልባል ውስጥ ይቃጠላሉ. የ calcined loop በእሳት ነበልባል ውስጥ ወደ የሙከራ ቱቦ ውስጥ ገብቷል inoculum ፣ ቀዝቅዞ እና ትንሽ ቁሳቁስ ከሰበሰበ በኋላ በጥንቃቄ ከመሃል ጋር ወደ የሙከራ ቱቦ ይተላለፋል።

በፈሳሽ ውስጥ በሚዘራበት ጊዜ የዘሩ ቁሳቁስ ከፈሳሹ በላይ ባለው የሙከራ ቱቦ ግድግዳ ላይ ተፈጭቶ በመካከለኛው ይታጠባል።

በፈሳሽ ሚድያ ላይ በቆርቆሮ ሲከተቡ መካከለኛው ውስጥ ይጠመቁ እና ለ 3-5 ሰከንድ ውስጥ ይታጠባሉ. በጠንካራ መካከለኛ ላይ በሚከተብበት ጊዜ ቁሳቁሱ ወደ ላይ ይንሸራተታል, ጥጥን በማዞር, ከዚያም በኋላ የንጽሕና መከላከያ (የሙከራ ቱቦ ውስጥ ወደ ላቦራቶሪ እና አውቶክላቭቭ ውስጥ ይመደባል).

ትኩረት! መካከለኛው እንዳይፈስ እና ማቆሚያውን እርጥብ እንዳይሆን እርግጠኛ ይሁኑ.

በ agar slants ላይ በሚከተቡበት ጊዜ ቁሱ ብዙውን ጊዜ በመገናኛው ላይ መሬት ላይ በዚግዛግ እንቅስቃሴ ከታች ወደ ላይ ይወጣል ፣ ከኮንደንስ ድንበር ጀምሮ።

በአንድ አምድ ውስጥ በሚገኙ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ በሚፈሱ ጠንካራ ሚዲያዎች ላይ በሚዘራበት ጊዜ ዓምዱ ዘርን በያዘ ሉፕ ይወጋዋል ፣ ይህም “ፕሪክ” ተብሎ የሚጠራውን መዝራት ይፈጥራል ።

ከተዘራ በኋላ ሉፕ ከቧንቧው ውስጥ ይወገዳል, የፍተሻ ቱቦዎች ጠርዞች ይቃጠላሉ እና መሰኪያዎቹን በማቃጠያ ነበልባል ውስጥ ካለፉ በኋላ, የፈተና ቱቦዎች ይዘጋሉ, ከዚያ በኋላ ሉፕ ይዘጋጃል.

ፈሳሽ ነገሮችን መከተብ የጸዳ ፓይፕቶችን (ፓስተር ወይም የተመረቀ) በመጠቀም ሊከናወን ይችላል. ከተከተቡ በኋላ, ፓይፕቶች በፀረ-ተባይ ፈሳሽ ውስጥ ይጠመቃሉ.

ወደ ጠርሙሶች ፣ ፍራሾች እና ጠርሙሶች መከተብ በግምት በተመሳሳይ መንገድ በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ይከናወናሉ ፣ ቁሳቁሱ ብቻ በመጀመሪያ ይሰበሰባል (በሉፕ ወይም በ pipette) ፣ ከዚያም መካከለኛ ያለው ዕቃ ይከፈታል።

የዘሩ ባህል ያላቸው መርከቦች ምልክት ይደረግባቸዋል እና በሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ይቀመጣሉ.

ከፔትሪ ምግብ ወደ የሙከራ ቱቦዎች መከተብ. በጽዋው ላይ ያለውን የሰብል እድገት ሁኔታ ካጠናሁ በኋላ ለመዝራት የሚያስፈልገውን ቦታ በሰም እርሳስ ምልክት ያድርጉበት። ከዘሩ ጋር ያለው ኩባያ ክዳኑ ወደ ላይ ከፍ ብሎ ከፊት ለፊትዎ ይቀመጣል. በግራ እጃችሁ ክዳኑን በትንሹ ይክፈቱት እና የተቃጠለውን ዑደት ከሱ ስር ያስገቡ። ምልክቱን ካቀዘቀዙ በኋላ, ምልክት ከተደረገበት ቦታ ላይ የዘር ቁሳቁሶችን ይሰብስቡ. ማዞሪያውን አውጣው፣ ጽዋውን ዝጋ እና የፈተናውን ቱቦ በግራ እጃችን መካከለኛው ውሰድ። መከተብ የሚከናወነው ከሙከራ ቱቦ እስከ የሙከራ ቱቦ ድረስ በተመሳሳይ መንገድ ነው. ከተዘራ በኋላ, ጽዋው ተገልብጧል.

በፔትሪ ምግቦች ውስጥ በአጋር ላይ መዝራት. በስፓታላ መዝራት። ስፓታላ የብርጭቆ ወይም የብረት ቱቦ ሲሆን መጨረሻው በሶስት ማዕዘን ቅርጽ የታጠፈ ነው. ስፓትላ ከፓስተር ፒፔት ሊሠራ ይችላል ቀጭን ጫፉን በማእዘን በማጣመም በእሳት ነበልባል ውስጥ ቀድመው ይሞቁ።

በግራ እጅዎ ክዳኑን በትንሹ ይክፈቱት, በአውራ ጣት እና በጣት ጣት ይያዙት. ሉፕ ፣ ፒፕት ወይም የመስታወት ዘንግ በመጠቀም ኢንኩሉሙን ወደ መካከለኛው ገጽ ላይ ይተግብሩ ፣ ከዚያ በክበብ እንቅስቃሴ ስፓቱላ በጥንቃቄ ያጠቡት ፣ ስፓቱላ በመካከለኛው ገጽ ላይ በነፃነት መንሸራተት እስኪያቆም ድረስ ፣ ክዳንዎን ከያዙ በኋላ በግራ እጅ እና በተመሳሳይ ጊዜ ጽዋውን ማዞር. በመዝራት መጨረሻ ላይ ስፓታላውን ከጽዋው ውስጥ ያስወግዱት እና ክዳኑን ይዝጉት. አንድ ብርጭቆ ስፓታላ በፀረ-ተባይ መፍትሄ ውስጥ ይቀመጣል, እና የብረት ስፓታላ በቃጠሎ ነበልባል ውስጥ ይሰላል.

በ loop መዝራት። አነስተኛ መጠን ያለው inoculum (አንዳንድ ጊዜ የጸዳ isotonic መፍትሔ ወይም መረቅ ውስጥ ቅድመ-emulsified) ወደ ሉፕ ወደ የወጭቱን ጠርዝ ላይ ያለውን መካከለኛ ወለል ላይ ሉፕ ጋር ማሻሸት, ብዙ ጊዜ ሉፕ ከጎን ወደ ጎን በማለፍ. ከዚያም ርዝራዡ በሚያልቅበት ቦታ ላይ አጋር በሎፕ ይወጋዋል, ይህም ከመጠን በላይ የዝርያ ቁሳቁሶችን ያስወግዳል. በሉፕ ላይ የሚቀረው ዘር በዚግዛግ እንቅስቃሴ በጠቅላላው የመካከለኛው ገጽ ላይ ይሰራጫል። በመዝራት መጨረሻ ላይ ጽዋውን ይዝጉ እና በሉፕ ውስጥ ያቃጥሉ.

በ loop ወደ ዘርፎች መዝራት። ጽዋው ከታች ወደ ሴክተሮች ተከፍሏል. መዝራት የሚከናወነው ከጽዋው ጠርዝ አንስቶ እስከ መሃሉ ድረስ ባለው የዚግዛግ እንቅስቃሴ ነው። ጭረቶች ወደ ተጓዳኝ ሴክተር እንዳይራዘሙ ማረጋገጥ ያስፈልጋል.

በጥጥ መዝራት። inoculum ያለው ታምፖን በትንሹ በተከፈተ ኩባያ ውስጥ ይቀመጥና ይዘቱ በመገናኛው ላይ በክብ እንቅስቃሴ ውስጥ ይታጠባል፣ ታምፖኑን እና ኩባያውን በማዞር ላይ።

ሣር መዝራት. በግምት 1 ሚሊ (20 ጠብታዎች) ፈሳሽ ባህል (ባህሉ ከጠንካራ መካከለኛ ከሆነ ፣ በንፁህ isotonic መፍትሄ ወይም መረቅ ውስጥ emulsified) በአጋር ወለል ላይ ይተገበራል እና ፈሳሹ በጥንቃቄ ይሰራጫል። መካከለኛ. ጽዋው በትንሹ ዘንበል ብሎ እና ከመጠን በላይ ባህሉ በ pipette ይጠባል, ወደ ፀረ-ተባይ መፍትሄ ያፈስሱ. ፒፕት እዚያም ተቀምጧል.

በአጋር ውስጥ መዝራት. በፈሳሽ መካከለኛ ወይም በተቀነባበረ ቁሳቁስ ውስጥ የሚበቅለው ባህል በ 45 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ በሚቀዘቅዘው የተቀላቀለ አጋር ወደ ዕቃ ውስጥ ይጨመራል ፣ ይደባለቃል እና በማይጸዳ የፔትሪ ሳህን ውስጥ ይፈስሳል። በባዶ ስኒ ውስጥ ዘርን መጨመር እና ከ15-20 ሚሊ ሜትር የአጋር ቅዝቃዜ እስከ 45 ° ሴ ድረስ ማፍሰስ ይችላሉ. የጽዋውን ይዘት ለመደባለቅ, በቀስታ ይንቀጠቀጡ እና ያሽከርክሩት. መካከለኛው ጠንካራ እስኪሆን ድረስ ኩባያዎቹ በጠረጴዛው ላይ ይቀመጣሉ.

የተዘሩት ስኒዎች ከታች ተለጥፈዋል እና ከታች ወደ ላይ ባለው የሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ይቀመጣሉ.

ጥያቄዎችን ይቆጣጠሩ

1. በሚዘራበት ጊዜ aseptic ሁኔታዎች አስፈላጊ ናቸው? መልስህን አረጋግጥ።

2. ከተዘራ በኋላ የሥራ ቦታ እንዴት መታከም አለበት?

የማብቀል ዘዴዎች

ለስኬታማ እርባታ ፣ በትክክል ከተመረጡት ሚዲያዎች እና በትክክል ከተዘሩ ዘሮች በተጨማሪ ጥሩ ሁኔታዎች ያስፈልጋሉ-ሙቀት ፣ እርጥበት ፣ አየር (የአየር አቅርቦት)። እንደ ደንቡ የተፈጥሮ አካባቢን ሁኔታ በጥንቃቄ በማባዛት ተስማሚ ሁኔታዎችን መፍጠር ይቻላል.

የሙቀት መጠን. በአብዛኛዎቹ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን (37 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ) ለማልማት በጣም ጥሩው የሙቀት መጠን በሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ይፈጠራል (ምስል 17)። ይህ መሳሪያ ሁለት ግድግዳዎች ያሉት መሳሪያ ሲሆን በመካከላቸው በኤሌክትሪክ የሚሞቅ አየር ወይም ውሃ አለ. የሚፈለገውን የሙቀት መጠን በራስ-ሰር የሚይዝ ቴርሞስታት እና የሙቀት መጠኑን የሚቆጣጠር ቴርሞሜትር አለው።

በመደርደሪያዎች, በሽቦ መጋገሪያዎች ወይም በጠርሙሶች ውስጥ ባህሎች ያላቸው የሙከራ ቱቦዎች በቴርሞስታት መደርደሪያ ላይ ይቀመጣሉ. በቴርሞስታት ውስጥ ያሉት ኩባያዎች ወደላይ መሆን አለባቸው. በቴርሞስታት ውስጥ ያለው አየር በነፃነት እንዲዘዋወር እና ማሞቂያው አንድ አይነት መሆኑን ለማረጋገጥ በቴርሞስታት ውስጥ ያሉት መደርደሪያዎቹ በቦታዎች የተሠሩ እና በጥብቅ የተጫኑ አይደሉም. ሰብሎችን ማቀዝቀዝ ለማስቀረት, ቴርሞስታት ለረጅም ጊዜ ክፍት አይቀመጥም.

የላብራቶሪ ቴክኒሻን በየቀኑ የሙቀት መጠኑን በቴርሞስታት ውስጥ እንዲመዘግብ እና በመሳሪያው ውስጥ ያለውን ንፅህና ለመጠበቅ እና ብልሽት ካለ ወደ ቴክኒሻን ይደውሉ።

ብርሃንአብዛኛዎቹ ማይክሮቦች (ሁሉም በሽታ አምጪ ተህዋሲያንን ጨምሮ) አያስፈልጋቸውም - በጨለማ ውስጥ ይበቅላሉ. ይሁን እንጂ በተበታተነ ብርሃን ውስጥ በበለጠ በንቃት የሚከሰተውን የቀለም አሠራር ለማጥናት, ባህሎቹ በክፍል ውስጥ ለ 2-3 ቀናት በሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ይቀመጣሉ.

ትኩረት! በሰብል ላይ ጎጂ ተጽእኖ ካለው ቀጥተኛ የፀሐይ ብርሃን መጋለጥን ያስወግዱ.

እርጥበት. ረቂቅ ተሕዋስያን ህይወት ያለ እርጥበት የማይቻል ነው - ንጥረ ነገሮች ወደ ሴል ውስጥ የሚገቡት በተሟሟት መልክ ብቻ ነው. ይህ በጠንካራ ሚዲያ ላይ በሚዘራበት ጊዜ ግምት ውስጥ መግባት አለበት: ወደ ኩባያዎች ማፍሰስ እና በሚዘራበት ቀን በሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ማጨድ ይሻላል. እንደ gonococci ያሉ በተለይ እርጥበት እጦት የሚሰማቸውን ማይክሮቦች ሲያዳብሩ ውሃ ያለው ክፍት ዕቃ በሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ይቀመጣል.

የእርሻ ጊዜ. አብዛኛዎቹ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ለ 18-24 ሰአታት ይመረታሉ, ነገር ግን ቀስ በቀስ (እስከ 4-6 ሳምንታት) የሚያድጉ ዝርያዎች አሉ. በእነሱ ውስጥ እርጥበትን ለማቆየት, ከተዘሩ በኋላ የጥጥ መሰኪያዎች በማይጸዳ ጎማ ይተካሉ ወይም የጎማ ክዳን በላያቸው ላይ ይደረጋል.

ትኩረት! የጎማ ማቆሚያዎች በወረቀት በተጠቀለለ አውቶክላቭ ውስጥ ይጸዳሉ።

አየር ማናፈሻ. ለነጻ ኦክሲጅን በማይክሮቦች ፍላጎት ላይ በመመስረት ወደ ኤሮቢስ እና አናሮቢስ ይከፋፈላሉ. ሁለቱም ቡድኖች የተለያዩ የባህል ሁኔታዎች ያስፈልጋቸዋል.

ኤሮቢስ እና ፋኩልቲካል anaerobes ለእርሻ አስፈላጊ ኦክስጅን አቅርቦት passive እና ንቁ aeration በኩል ይካሄዳል.

Passive aeration በጠንካራ እና በፈሳሽ ሚዲያዎች በጥጥ ወይም በጥጥ-ፋሻ ማቆሚያዎች በተዘጉ መርከቦች ወይም በፔትሪ ምግቦች ውስጥ ማልማት ነው። በእንደዚህ ዓይነት እርባታ ወቅት ማይክሮቦች በመካከለኛው ውስጥ የሚሟሟ ኦክስጅንን ይበላሉ, ከመካከለኛው በላይ ባለው እቃ ውስጥ እና በማቆሚያው ውስጥ ይገባሉ. በከባቢ አየር ውስጥ አየር ውስጥ የሚገቡ ሰብሎች በከባቢ አየር ውስጥ ኦክሲጅን ወደ ውስጥ በሚገቡበት ቦታ ላይ ወይም በቀጭኑ የመገናኛ ዘዴዎች ሊበቅሉ ይችላሉ.

በትላልቅ መካከለኛ መጠን ሲበቅሉ ገባሪ አየር ማብቀል ማይክሮቦችን በጥልቀት ለማልማት ያገለግላል። እንደነዚህ ያሉ ሰብሎችን በኦክሲጅን በበቂ ሁኔታ ለማቅረብ ልዩ በሆኑ ወንበሮች ውስጥ ይቀመጣሉ - ሰብሉን የማያቋርጥ ማነሳሳት ከአየር ጋር ንክኪ መኖሩን ያረጋግጣል. በፈሳሽ መጠን ወደ አሥር እና በመቶዎች የሚቆጠሩ ሊትር በሚደርስበት ጊዜ, ሬአክተሮች ወይም fermenters በሚባሉት መሳሪያዎች ውስጥ የሚከናወነው አየር ልዩ መሳሪያዎችን በመጠቀም በባህሉ ውስጥ ይነፍስበታል.

የአናሮቢስ እርባታከኤሮብስ የበለጠ ከባድ ነው ምክንያቱም ከአየር ነፃ ኦክሲጅን ማግኘት መከልከል አለባቸው። ይህንን ለማድረግ አየር ከንጥረ ነገሮች ውስጥ በተለያየ መንገድ ይወገዳል.

የአክቲኖሚሴቴስ ፣ የፈንገስ ፣ mycoplasmas ፣ L-forms ፣ spirochetes እና protozoa ማልማት።. የእነዚህ ረቂቅ ተሕዋስያን እርባታ በመሠረቱ ከባክቴሪያዎች ማልማት ጋር ተመሳሳይ ነው. ለእነሱ ልዩ አከባቢዎች ተዘጋጅተዋል እና ፍላጎታቸውን የሚያሟሉ ሁነታዎች ተመርጠዋል.

ንፁህ ባህል በጠንካራ ወይም በፈሳሽ ንጥረ-ምግብ መካከለኛ ላይ አንድ ዓይነት ዝርያ ያላቸው ማይክሮቦች ስብስብ ነው.

በተጠናው ቁሳቁስ ባህሪያት እና በጥናቱ ዓላማ ላይ በመመርኮዝ የንጹህ ባህልን ለመለየት በርካታ ዘዴዎች አሉ. በተለምዶ ንፁህ ባህሎች የሚገኙት ከተናጥል ቅኝ ግዛቶች - በጠንካራ መካከለኛ ላይ ያሉ የማይክሮቦች ስብስቦች ናቸው. ብዙውን ጊዜ ቅኝ ግዛት ከአንድ ማይክሮብል ሴል ውስጥ እንደሚፈጠር ይታመናል, ማለትም የዚህ ረቂቅ ተሕዋስያን ንጹህ ባህል ነው.

ንጹህ ባህልን የማግለል ደረጃዎች;

ቀን 1 - ገለልተኛ ቅኝ ግዛቶችን ማግኘት. የሙከራ ቁሳቁሱ ጠብታ በፔትሪ ምግብ ውስጥ በአጋር ገጽ ላይ በሎፕ ፣ በ pipette ወይም በመስታወት ዘንግ ይተገበራል። ቁሳቁሱን ወደ መካከለኛው ገጽ ላይ ለማሻሸት ስፓታላ ይጠቀሙ; ስፓታላውን ሳታቃጥሉ ወይም ሳታጠፉ በ 2 ኛ እና ከዚያም በ 3 ኛ ኩባያ ላይ ዘሩ. በእንደዚህ አይነት መዝራት, 1 ኛ ኩባያ ብዙ ቁሳቁሶችን እና, በዚህ መሰረት, ብዙ ማይክሮቦች, 2 ኛ ኩባያ ያነሰ እና 3 ኛ ኩባያ ደግሞ ያነሰ ነው.

ገለልተኛ ቅኝ ግዛቶች በ loop መዝራት ሊገኙ ይችላሉ። ይህንን ለማድረግ, በጥናት ላይ ያለው ቁሳቁስ በሾርባ ወይም በ isotonic sodium ክሎራይድ መፍትሄ ውስጥ ይሞላል.

ቀን 2 - በጠፍጣፋዎቹ ላይ ማይክሮቦች እድገትን ያጠኑ. በ 1 ኛ ኩባያ ውስጥ ብዙውን ጊዜ የማያቋርጥ እድገት አለ - ገለልተኛ ቅኝ ግዛትን ማግለል አይቻልም. ገለልተኛ ቅኝ ግዛቶች በ 2 ኛ እና 3 ኛ ሳህኖች ውስጥ በአጋር ወለል ላይ ይበቅላሉ. በአይን፣ በአጉሊ መነጽር፣ በአጉሊ መነጽር ዝቅተኛ ማጉላት እና አንዳንዴም ስቴሪዮስኮፒክ ማይክሮስኮፕ (ምዕራፍ 31 ይመልከቱ) ይጠናሉ። የሚፈለገው ቅኝ ግዛት ከምድጃው ስር ምልክት ተደርጎበታል እና በአጋር ዘንበል ላይ እንደገና ይከተታል። ሰብሎቹ በሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ይቀመጣሉ.

ትኩረት! የተገለሉ ቅኝ ግዛቶች ብቻ እንደገና ሊዘሩ ይችላሉ።

ቀን 3 - በ agar slants ላይ ያለውን የእድገት ንድፍ ያጠኑ. ስሚር ያደርጋሉ፣ ያቆሽሹታል እና ባህሉ ንጹህ መሆኑን በማረጋገጥ ማጥናት ይጀምራሉ። የንፁህ ባህል መገለል የሚያበቃው እዚህ ላይ ነው። ከተወሰነ ምንጭ የተነጠለ እና የተጠና ባህል ውጥረት ይባላል.

ንፁህ ባህልን ከደም (hemoculture) በሚለይበት ጊዜ በመጀመሪያ በፈሳሽ መካከለኛ ውስጥ "ያበቅላል" ከ 10-15 ሚሊ ሜትር የተጣራ ደም በ 100-150 ሚሊ ሜትር ፈሳሽ ውስጥ ይከተታል. ይህ የሚደረገው በደም ውስጥ ብዙውን ጊዜ ጥቂት ማይክሮቦች ስለሚኖሩ ነው. የተከተበው ደም እና የንጥረ-ምግብ መካከለኛ መጠን 1:10 ድንገተኛ አይደለም - በዚህ መንገድ ነው የደም ማሟሟት (ያልተቀላቀለ ደም ረቂቅ ተሕዋስያን ላይ ጎጂ ውጤት አለው). የተከተቡ ጠርሙሶች በሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ይቀመጣሉ. ከአንድ ቀን በኋላ (አንዳንድ ጊዜ ከረዥም ጊዜ በኋላ, እንደ ባህሉ እንደ ተገለሉ), የፍላሳዎቹ ይዘቶች ገለልተኛ ቅኝ ግዛቶችን ለማግኘት በሳህኖች ላይ ይከተላሉ. አስፈላጊ ከሆነ ከ2-3 ቀናት ባለው ጊዜ ውስጥ ዘሩን ይድገሙት.

የንጹህ ባህልን ከሽንት, ከጨጓራ እጥበት እና ከሌሎች ፈሳሾች በሚለዩበት ጊዜ, በመጀመሪያ በአሴፕቲክ ሁኔታዎች ውስጥ ማእከላዊ ይደረጋሉ እና ደለል ይከተላሉ. የንጹህ ባህል ተጨማሪ ማግለል በተለመደው መንገድ ይከናወናል.

የተመረጡ ሚዲያዎች ንፁህ ባህሎችን ለመለየት በሰፊው ጥቅም ላይ ይውላሉ።

በርካታ ዘዴዎች ንጹህ ባህሎችን ለማግኘት የገለልተኛ ማይክሮቦች ባዮሎጂያዊ ባህሪያትን ይጠቀማሉ. ለምሳሌ, ስፖሮ-ፈሳሽ ባክቴሪያዎችን ሲገለሉ, ሰብሎቹ በ 80 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ለ 10 ደቂቃዎች ይሞቃሉ, በዚህም የእፅዋት ቅርጾችን ይገድላሉ; እነዚህን ንጥረ ነገሮች በመጠቀም ከአሲድ እና ከአልካላይስ የመቋቋም ችሎታ ያለው የሳንባ ነቀርሳ በሽታ አምጪ ተህዋስያንን በሚለይበት ጊዜ የዘሩ ቁሳቁስ ከተጓዳኝ እፅዋት ነፃ ይወጣል ። pneumococcus እና ፕላግ ባሲለስን ለመለየት, የሙከራው ቁሳቁስ ወደ ነጭ አይጦች ውስጥ ይጣላል - በአካላቸው ውስጥ, ለእነዚህ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን በጣም ስሜታዊ ነው, እነዚህ ማይክሮቦች ከሌሎች በበለጠ ፍጥነት ይባዛሉ.

በምርምር ሥራ በተለይም በጄኔቲክ ምርምር ውስጥ ከአንድ ሕዋስ ባህሎችን ማግኘት አስፈላጊ ነው. ይህ ባህል ክሎኒ ይባላል. እሱን ለማግኘት ማይክሮማኒፑላተር ብዙውን ጊዜ ጥቅም ላይ ይውላል - በአጉሊ መነጽር መጠን ያላቸው መሳሪያዎች (መርፌዎች ፣ ቧንቧዎች) የተገጠመ መሣሪያ። በአጉሊ መነጽር ቁጥጥር ስር ያለ መያዣን በመጠቀም በተንጠለጠለ ጠብታ ዝግጅት ውስጥ እንዲገቡ ይደረጋሉ, የሚፈለገው ሕዋስ (አንድ) ይወገዳል እና ወደ ንጥረ-ምግብ መካከለኛ ይተላለፋል.

የተመረጡ ሰብሎች ጥናት

ሞርፎሎጂ, ተንቀሳቃሽነት, tinctorial ንብረቶች ጥናት (ምዕራፍ 3 ይመልከቱ), ሚዲያ ላይ እድገት ተፈጥሮ (ባህላዊ ንብረቶች), enzymatic እንቅስቃሴ እና ሌሎች በርካታ ባህሪያት ተነጥለው ተሕዋስያን, taxonomic ቦታ ለመመስረት ያስችለናል, ማለትም ረቂቅ ተሕዋስያንን መድብ. : ዝርያውን, ዝርያውን, ዓይነት, ንዑስ ዓይነት, ልዩነቱን ይወስኑ. ይህ መታወቂያ ይባላል። ረቂቅ ተሕዋስያንን መለየት ኢንፌክሽኖችን በመመርመር፣ የመተላለፊያ ምንጮችን እና መንገዶችን በማቋቋም እና በሌሎች በርካታ ሳይንሳዊ እና ተግባራዊ ጥናቶች ውስጥ በጣም አስፈላጊ ነው።

የባህል ባህሪያት

በመገናኛ ብዙሃን ላይ የተለያዩ አይነት ረቂቅ ተሕዋስያን በተለያየ መንገድ ያድጋሉ. እነዚህ ልዩነቶች እነሱን ለመለየት ያገለግላሉ. አንዳንዶቹ በቀላል ሚዲያ ላይ በደንብ ያድጋሉ, ሌሎች ደግሞ የሚጠይቁ እና በልዩ ሚዲያ ላይ ብቻ ያድጋሉ. ረቂቅ ተሕዋስያን የተትረፈረፈ (ለምለም) እድገትን፣ መካከለኛ ወይም ትንሽ እድገትን ሊፈጥሩ ይችላሉ። ባህሎች ቀለም የሌላቸው, ግራጫማ ወይም ሰማያዊ-ግራጫ ሊሆኑ ይችላሉ. ቀለም የሚያመርቱ ረቂቅ ተሕዋስያን ባህሎች የተለያዩ ቀለሞች አሏቸው-ነጭ ፣ ቢጫ ወይም ወርቃማ ለስታፊሎኮከስ ፣ ቀይ ለተአምራዊው ዘንግ ፣ ሰማያዊ-አረንጓዴ ለሰማያዊ-አረንጓዴ በትር ፣ በውሃ ውስጥ የሚሟሟ ቀለም ፣ ቅኝ ግዛቶችን ብቻ ሳይሆን ቀለሞችን ይሳሉ። , ግን ደግሞ አካባቢ.

በጠባብ ላይአከባቢዎች ፣ ረቂቅ ህዋሳት ፣ እንደ ኢንኩሉም መጠን ፣ ቀጣይነት ያለው ሽፋን (“ሳር”) ወይም ገለልተኛ ቅኝ ግዛቶች ይመሰርታሉ። ባህሎች ሸካራ እና ስስ፣ ግልጽ እና ግልጽ ያልሆኑ፣ ማት፣ አንጸባራቂ፣ ለስላሳ፣ ሸካራ፣ ደረቅ፣ ጎበጥ ያሉ ሊሆኑ ይችላሉ።

ቅኝ ግዛቶች ትልቅ (ከ4-5 ሚሜ ዲያሜትር ወይም ከዚያ በላይ), መካከለኛ (2-4 ሚሜ), ትንሽ (1-2 ሚሜ) እና ድንክ (ከ 1 ሚሜ ያነሰ) ሊሆኑ ይችላሉ. እነሱ በቅርጽ ይለያያሉ ፣ በመካከለኛው ገጽ ላይ ያሉ ቦታዎች (ኮንቬክስ ፣ ጠፍጣፋ ፣ ጉልላት-ቅርጽ ፣ ድብርት ፣ ክብ ፣ ሮዝቴ-ቅርጽ) እና የጠርዙ ቅርፅ (ለስላሳ ፣ ሞገድ ፣ ወጣ ገባ)።

በፈሳሽ ውስጥአከባቢዎች ፣ ረቂቅ ህዋሳት አንድ ወጥ የሆነ ብጥብጥ ይፈጥራሉ ፣ ደለል (ጥራጥሬ ፣ አቧራማ ፣ ጠፍጣፋ) ወይም ፊልም (ጨረታ ፣ ሻካራ ፣ የተሸበሸበ) ማምረት ይችላሉ ።

በከፊል ፈሳሽ ላይበመገናኛ ብዙሃን ውስጥ በፒች ሲከተቡ ተንቀሳቃሽ ማይክሮቦች በመካከለኛው ውፍረት ላይ ብጥብጥ ያስከትላሉ, የማይንቀሳቀሱ ረቂቅ ተሕዋስያን ግን በ "ፕሪክ" ላይ ብቻ ይበቅላሉ, ቀሪው መካከለኛ ግልጽነት ይኖረዋል.

የባህል ባህሪያት የሚወሰኑት የባህሉን የዕድገት ንድፍ በቀላል ዓይን በማጥናት፣ በማጉያ መነጽር፣ በዝቅተኛ አጉሊ መነጽር ወይም ስቴሪዮስኮፒክ ማይክሮስኮፕ በመጠቀም ነው። የቅኝ ግዛቶች መጠን እና ቅርፅ ፣ የጠርዙ ቅርፅ እና ግልፅነት በሚተላለፈው ብርሃን ላይ ይማራሉ ፣ ሳህኖቹን ከታች ይመረምራል። በተንፀባረቀ ብርሃን (ከክዳኑ ጎን), የገጽታ እና የቀለም ተፈጥሮ ይወሰናል. ወጥነት የሚወሰነው ዑደቱን በመንካት ነው።

ሞሮሎጂካል ባህሪያት

ማይክሮቦች ሞርፎሎጂ ጥናት እነሱን ለመለየትም ያገለግላል. ሞርፎሎጂ በቆሸሸ ዝግጅቶች ውስጥ ይማራል. የሴሎች ቅርፅ እና መጠን, በዝግጅቱ ውስጥ ያሉበት ቦታ, ስፖሮች, እንክብሎች እና ባንዲራዎች መኖራቸውን ይወሰናል. በቀለማት ያሸበረቁ ዝግጅቶች, ማይክሮቦች ከቀለም ጋር ያለው ግንኙነት ይወሰናል (የቲንቶሪያል ባህሪያት) - ቀለሞችን በደንብ ወይም በደንብ ይገነዘባሉ, እንደ ልዩነት ነጠብጣብ (በግራም, ዚሄል-ኒልሰን, ወዘተ መሰረት ምን ዓይነት ቀለም እንደሚቀባ) ይገነዘባሉ. ወሳኝ (ኢንትራቪታል) ማቅለሚያ እንቅስቃሴን ለመመስረት, ህይወት ያላቸው እና የሞቱ ሴሎችን ለመለየት እና ክፍሎቻቸውን ለመከታተል ያስችልዎታል. መከፋፈል እና መንቀሳቀሻ በአገርኛ (ያልቆሸሸ) ዝግጅቶች ሊጠና ይችላል (ምዕራፍ 3 ይመልከቱ)።

የኢንዛይም እንቅስቃሴ

ረቂቅ ተሕዋስያን ኢንዛይም እንቅስቃሴ ሀብታም እና የተለያየ ነው. እሱን በመጠቀም ፣ የማይክሮቦችን ዝርያ እና ዓይነት ብቻ ሳይሆን ተለዋጮችን (ባዮቫርስ የሚባሉትን) መወሰን ይችላሉ ። ዋናውን የኢንዛይም ባህሪያት እና የጥራት ውሳኔያቸውን እንመርምር.

የካርቦሃይድሬትስ ስብራት(የሳካሮሊቲክ እንቅስቃሴ) ማለትም የስኳር እና የ polyhydric አልኮሎችን በአሲድ ወይም በአሲድ እና በጋዝ መፈጠር የመበታተን ችሎታ አንድ ወይም ሌላ ካርቦሃይድሬት እና አመላካች በያዘው በሂስ ሚዲያ ላይ ጥናት ይደረጋል። ካርቦሃይድሬትስ በሚፈርስበት ጊዜ በተፈጠረው አሲድ ተጽእኖ, ጠቋሚው መካከለኛውን ቀለም ይለውጣል. ስለዚህ, እነዚህ አከባቢዎች "የተለያዩ ተከታታይ" ተብለው ይጠራሉ. የተሰጠውን ካርቦሃይድሬትስ የማይቦካው ማይክሮቦች ሳይቀይሩት በመገናኛው ላይ ይበቅላሉ። ጋዝ መኖሩ የሚወሰነው በአጋር ውስጥ አረፋዎች በሚፈጠሩበት ጊዜ ወይም በፈሳሽ ሚዲያ ላይ ባለው "ተንሳፋፊ" ውስጥ በማከማቸት ነው. “ተንሳፋፊ” ጠባብ የመስታወት ቱቦ ሲሆን የታሸገ ጫፍ ወደ ላይ የሚመለከት ሲሆን ይህም ከማምከን በፊት መካከለኛ በሆነ የሙከራ ቱቦ ውስጥ ይቀመጣል (ምሥል 18)።

ሩዝ. 18. ረቂቅ ተሕዋስያን saccharolytic እንቅስቃሴ ጥናት. I - "የተለዋዋጭ ረድፍ": a - ፈሳሽ መካከለኛ ከካርቦሃይድሬት እና የአንድሬድ አመልካች; ለ - ከፊል ፈሳሽ መካከለኛ ከ BP አመልካች ጋር: 1 - ረቂቅ ተሕዋስያን ካርቦሃይድሬትን አያፈሱም; 2 - ረቂቅ ተሕዋስያን አሲድ እንዲፈጠር ካርቦሃይድሬትን ያፈሳሉ; 3 - ረቂቅ ተሕዋስያን አሲድ እና ጋዝ ከመፍጠር ጋር ካርቦሃይድሬትን ያፈሳሉ; II - የማይበሰብሱ ረቂቅ ተሕዋስያን ቅኝ ግዛቶች (ቀለም የሌለው) እና ላክቶስ (በ EMC መካከለኛ ላይ ሐምራዊ - በግራ በኩል, በ Endo መካከለኛ ላይ ቀይ - በቀኝ በኩል) መበስበስ.

በተጨማሪም, saccharolytic እንቅስቃሴ በ Endo, EMS እና Ploskirev ሚዲያ ላይ ያጠናል. ረቂቅ ተሕዋስያን, በእነዚህ ሚዲያዎች ውስጥ የሚገኘውን የወተት ስኳር (ላክቶስ) ወደ አሲድ በማፍላት, ባለ ቀለም ቅኝ ግዛቶችን ይፈጥራሉ - አሲድ በመገናኛ ብዙሃን ውስጥ ያለውን አመላካች ቀለም ይለውጣል. ላክቶስ የማይራቡ የማይክሮቦች ቅኝ ግዛቶች ቀለም የሌላቸው ናቸው (ምሥል 18 ይመልከቱ).

ላክቶስን የሚያመርቱ ረቂቅ ተህዋሲያን በማደግ ምክንያት ወተት ይርገበገባል።

አሚላሴን የሚያመርቱ ረቂቅ ተሕዋስያን የሚሟሟ ስታርች በያዙ ሚዲያዎች ላይ ሲበቅሉ ስታርች ይሰበራል። ጥቂት የሉጎልን መፍትሄ ወደ ባህል በመጨመር ስለዚህ ጉዳይ ይማራሉ - የመካከለኛው ቀለም አይለወጥም. ያልተፈጨ ስታርች በዚህ መፍትሄ ሰማያዊ ቀለም ይሰጣል.

ፕሮቲዮቲክ ባህሪያት(ማለትም ፕሮቲኖችን, ፖሊፔፕቲዶችን, ወዘተ) የመበስበስ ችሎታን በጂላቲን, ወተት, ዊዝ እና ፔፕቶን ላይ በመገናኛ ብዙሃን ያጠናል. ጄልቲንን የሚያፈሉት ማይክሮቦች በጂልቲን መካከለኛ ላይ ሲያድጉ መካከለኛው ፈሳሽ ይወጣል. በተለያዩ ማይክሮቦች ምክንያት የሚፈጠረው ፈሳሽ ተፈጥሮ የተለየ ነው (ምሥል 19). casein (የወተት ፕሮቲን) የሚያበላሹ ማይክሮቦች ወተት peptonization ያስከትላል - whey መልክ ይወስዳል. ፔፕቶኖች ሲሰበሩ, ኢንዶል, ሃይድሮጂን ሰልፋይድ እና አሞኒያ ሊለቀቁ ይችላሉ. የእነሱ አፈጣጠር አመላካች ወረቀቶችን በመጠቀም ይወሰናል. የማጣሪያ ወረቀት በተወሰኑ መፍትሄዎች ቀድመው ተተክሏል, ደርቋል, ከ5-6 ሴ.ሜ ርዝመት ያለው ጠባብ ቁራጮች ይቁረጡ እና በ MPB ላይ ባህሉን ከዘሩ በኋላ በእሱ እና በሙከራው ቱቦ ግድግዳ መካከል ባለው ማቆሚያ ስር ይቀመጣል. በቴርሞስታት ውስጥ ከተመረተ በኋላ ውጤቱ ግምት ውስጥ ይገባል. አሞኒያ የሊቲመስ ወረቀት ወደ ሰማያዊነት ይለወጣል; ሃይድሮጂን ሰልፋይድ በ 20% እርሳስ አሲቴት እና ሶዲየም ባይካርቦኔት ውስጥ በተቀባ ወረቀት ላይ ሲወጣ እርሳስ ሰልፌት ይፈጠራል - ወረቀቱ ወደ ጥቁር ይለወጣል; indole በኦክሌሊክ አሲድ መፍትሄ ውስጥ የተዘፈዘ ወረቀት መቅላት ያስከትላል (ምሥል 19 ይመልከቱ)።

ከእነዚህ ሚዲያዎች በተጨማሪ ረቂቅ ተሕዋስያን የተለያዩ የንጥረ-ምግብ ንጣፎችን የማፍረስ ችሎታ የሚወሰነው በተወሰኑ ሬጀንቶች (የወረቀት አመልካች ስርዓቶች "SIB") የታጠቁ የወረቀት ዲስኮች በመጠቀም ነው. እነዚህ ዲስኮች ባህሉ እየተመረመረ ወደ የሙከራ ቱቦዎች ይወርዳሉ እና በ 37 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ የሙቀት መቆጣጠሪያ ውስጥ ከ 3 ሰአታት በኋላ የካርቦሃይድሬትስ ፣ የአሚኖ አሲዶች ፣ ፕሮቲኖች ፣ ወዘተ መበስበስ በዲስኮች ቀለም ይለወጣል ።

የሂሞሊቲክ ባህሪያት (ቀይ የደም ሴሎችን የማጥፋት ችሎታ) በደም ሚዲያዎች ውስጥ ይማራሉ. በዚህ ሁኔታ ፈሳሽ ሚዲያዎች ግልጽ ይሆናሉ, እና ጥቅጥቅ ባሉ ሚዲያዎች ላይ ግልጽ የሆነ ዞን በቅኝ ግዛት ዙሪያ ይታያል (ምስል 20). ሜቲሞግሎቢን ሲፈጠር መካከለኛው አረንጓዴ ይሆናል.

የባህሎች ጥበቃ

ለሳይንስ ወይም ለምርት ጠቃሚ የሆኑ የተገለሉ እና የተጠኑ ባህሎች (ዝርያዎች) በህያው ባህሎች ሙዚየሞች ውስጥ ይቀመጣሉ። የሁሉም ዩኒየን ሙዚየም የሚገኘው በስሙ የተሰየመው በስቴት የምርምር ተቋም ለደረጃና ለህክምና ባዮሎጂካል ዝግጅቶች ቁጥጥር ነው። L.A. Tarasevich (GISK).

የማጠራቀሚያው ዓላማ ረቂቅ ተሕዋስያንን አዋጭነት ለመጠበቅ እና ተለዋዋጭነታቸውን ለመከላከል ነው. ይህንን ለማድረግ በማይክሮባላዊ ሕዋስ ውስጥ ያለውን ልውውጥ ማዳከም ወይም ማቆም አስፈላጊ ነው.

የረጅም ጊዜ ባህልን ለመጠበቅ በጣም የላቁ ዘዴዎች አንዱ lyophilization - ከቀዘቀዘ ሁኔታ በቫኩም ውስጥ ማድረቅ የታገደ አኒሜሽን ሁኔታን ለመፍጠር ያስችልዎታል። ማድረቅ የሚከናወነው በልዩ መሳሪያዎች ውስጥ ነው. በ 4 ዲግሪ ሴንቲግሬድ የሙቀት መጠን ውስጥ በታሸጉ አምፖሎች ውስጥ ባህሎችን ያከማቹ, በተለይም በ -30-70 ° ሴ.

የደረቁ ሰብሎችን መልሶ ማቋቋም. የአምፑሉን ጫፍ በማቃጠያው ነበልባል ውስጥ አጥብቀው ያሞቁ እና በቀዝቃዛ ውሃ በትንሹ እርጥብ በሆነ የጥጥ ሳሙና ይንኩት በመስታወቱ ላይ ማይክሮክራኮች እንዲፈጠሩ እና አየር ቀስ በቀስ ወደ አምፖሉ ውስጥ ይገባል። በተመሳሳይ ጊዜ, በተሰነጣጠሉት የጦፈ ጠርዞች ውስጥ በማለፍ, አየሩ ይጸዳል.

* (በ tampon ላይ ከመጠን በላይ ውሃ ካለ, ወደ አምፑል ውስጥ ሊገባ እና የባህሉን መሃንነት ሊያስተጓጉል ይችላል: በአምፑል ውስጥ ክፍተት ስላለ በተፈጠሩት ማይክሮክራኮች ውስጥ ይጠባል.)

ትኩረት! በታሸገው አምፖል ውስጥ ባዶ ቦታ መኖሩን አይርሱ. አየር በትልቅ ጉድጓድ ውስጥ ወዲያውኑ ከገባ, በአምፑል ውስጥ ያለው ባህል ሊረጭ እና ሊወጣ ይችላል.

አየር እንዲገባ በመፍቀድ የአምፑሉን የላይኛው ክፍል በቲማዎች በፍጥነት ይሰብሩ እና ያስወግዱት። ጉድጓዱን በትንሹ ያቃጥሉ እና ፈሳሽ (ሾርባ ወይም ኢሶቶኒክ መፍትሄ) ወደ አምፑል በማይጸዳው የፓስተር ፒፕት ወይም መርፌ ውስጥ ይጨምሩ። የአምፑሉን ይዘት ያዋህዱ እና በመገናኛ ብዙሃን ላይ ይክሉት. በመጀመሪያዎቹ ተክሎች ውስጥ የተመለሱት ሰብሎች እድገታቸው ሊቀንስ ይችላል.

ሰብሎች በልዩ መሳሪያዎች ውስጥ በፈሳሽ ናይትሮጅን (-196 ° C) ውስጥ ለረጅም ጊዜ ሊቆዩ ይችላሉ.

ባህሎች ለአጭር ጊዜ የመቆያ ዘዴዎች የሚከተሉት ናቸው፡- 1) እንደ ረቂቅ ተሕዋስያን፣ መካከለኛና አዝርዕት ሁኔታዎች ላይ በመመርኮዝ በየተወሰነ ጊዜ ንዑሳን ማልማት (በአዲስ ሚዲያ ላይ በየጊዜው ማደግ)። እንደገና በመትከል መካከል, ባህሎች በ 4 ° ሴ ይቀመጣሉ; 2) በዘይት ንብርብር ስር ማቆየት. ባህሉ ከ5-6 ሴ.ሜ ከፍታ ባለው አምድ ውስጥ በአጋር ውስጥ ይበቅላል ፣ በንፁህ የፔትሮሊየም ጄሊ (በዘይት ሽፋን በግምት 2 ሴ.ሜ) የተሞላ እና በአቀባዊ በማቀዝቀዣ ውስጥ ይቀመጣል። የተለያዩ ረቂቅ ተሕዋስያን የመደርደሪያው ሕይወት የተለየ ነው ፣ ስለሆነም ባህሉ አዋጭነቱን ለማረጋገጥ ከሙከራ ቱቦዎች ውስጥ በየጊዜው ይዘራል ። 3) በ -20-70 ° ሴ ማከማቻ; 4) በታሸጉ ቱቦዎች ውስጥ ማከማቸት. አስፈላጊ ከሆነ, የተከማቸ ቁሳቁስ በአዲስ ሚዲያ ላይ ይዘራል.

ጥያቄዎችን ይቆጣጠሩ

1. "በባክቴሪያ ምርምር" ጽንሰ-ሐሳብ ውስጥ ምን ይካተታል?

2. ለእንደዚህ አይነት ምርምር ባሕል ምን መሆን አለበት?

3. የማይክሮባላዊ ቅኝ ግዛት, ባህል, ውጥረት, ክሎኔ ምንድን ነው?

4. "የማይክሮቦች ባህላዊ ባህሪያት" ጽንሰ-ሐሳብ ውስጥ ምን ይካተታል?

የአካል ብቃት እንቅስቃሴ ያድርጉ

1. በርካታ ቅኝ ግዛቶችን አጥኑ እና ይግለጹ። ወደ agar slants እና ወደ ሴክተር ያስተላልፉዋቸው.

2. በአጋር ስላንት ላይ የባህሉን የእድገት ንድፍ አጥኑ እና ይግለጹ። በቆሸሸው ዝግጅት ውስጥ የባህሉን ንፅህና እና ሞርሞሎጂን ይወስኑ.

3. ባህሉን ከአጋር ስላንት ወደ ሾርባ እና ልዩነት የመመርመሪያ ሚዲያ ያስተላልፉ. በእነዚህ ሚዲያዎች እና ኢንዛይማዊ ባህሪያቱ ላይ የባህሉን የእድገት ንድፍ በፕሮቶኮሉ ውስጥ አጥኑ እና ይመዝግቡ።